“肺肠合病”模型大鼠的建立与评价 -中医临床基础专业论文.docx

摘 要 目的 本研究试图通过动物实验，在“肺与大肠相表里”中医理论指导下，建立与 临床原型相似的大鼠“肺肠合病”（哮喘合便秘）模型，为“肺与大肠相表里” 理论的实验研究奠定基础，同时比较观察模型动物“肺肠合病”表征与生物学指 标变化，及其对应变化的关系，确立该模型的评价体系。 方法 选用 SPF 级健康雄性 Wistar 大鼠 40 只，随机分为 4 组：空白对照组，“肺 病”（哮喘）模型组、“肠病”（便秘）模型组、“肺肠合病”（哮喘合便秘）模型 组，每组大鼠 10 只。“肺病”（哮喘）模型组的制备，将 OVA1 mg 和氢氧化铝 200 mg 溶于生理盐水 1ml 中新鲜配制成凝胶致敏剂，第 1 天和第 8 天在大鼠双 侧胸部、腹股沟共 4 点各皮下注射 0.15ml 该致敏剂，同时腹腔注射 0.4ml 共计 1ml 进行致敏。第 15 天开始将大鼠置于有机玻璃盒内，超声雾化吸入 1％OVA 诱 发哮喘，每天 1 次，每次 30 min，雾化 1w，共 21 天。“肠病”（便秘）模型组 的制备，灌胃复方地芬诺酯片，剂量 10mg/kg，隔天 1 次。“肺肠合病”（哮喘 合便秘）模型组的制备，灌胃给予复方地芬诺酯（剂量为 10mg/kg），隔天 1 次； 同时，将 OVA1 mg 和氢氧化铝 200 mg 溶于生理盐水 1ml 中配制成凝胶致敏剂， 第 1 天和第 8 天在大鼠双侧胸部、腹股沟共 4 点各皮下注射 0.15ml 该致敏剂， 同时腹腔注射 0.4ml 共计 1ml 进行致敏。第 15 天开始将大鼠置于有机玻璃盒内， 超声雾化吸入 1％OVA 诱发哮喘，每天 1 次，每次 30 min，雾化 1w，共 21 天。 空白对照组灌胃等量蒸馏水并用生理盐水超声雾化吸入。制备“肺肠合病”模型 组后，检测大鼠肺功能、胃肠功能、肺肠菌群等生理病理指标，用光镜、电镜观 察组织 HE 染色、超微结构等病理形态学的改变情况。 结果 1.从哮喘程度看，“肺肠合病”组大鼠哮喘的程度比空白组、“肺病”组严重， 有显著性差异（P﹤0.01）。 I 2.大鼠粪便性状观察：与空白对照组、“肺病”组相比，“肺肠合病”组大鼠 的粪便干湿重均明显降低，粪便颗粒数明显减少，有显著性差异（P﹤0.01）；与 “肠病”组比较，“肺肠合病”组大鼠的肠推进值、粪便干湿重均降低，粪便颗 粒数减少，有差异（P﹤0.05）。 3.血常规检测：与空白组比较，“肺肠合病”组大鼠血液中白细胞、中性粒 细胞计数明显升高，淋巴细胞数和中间细胞数升高，有显著性差异（P﹤0.01)； 与“肠病”组比较，“肺肠合病”组大鼠血液中白细胞、中性粒细胞计数明显升 高，淋巴细胞数和中间细胞计数胞数升高，有显著性差异（P﹤0.01)；与“肺病” 组比较，“肺肠合病”组大鼠血液中白细胞、淋巴细胞数无差异（P﹥0.05)，中 性粒细胞和中间细胞计数升高，有差异（P﹤0.05)。 4.肺功能检测：与空白对照组相比，“肺肠合病”组大鼠的呼吸频率升高， 每分钟通气量降低，潮气量降低（P﹤0.01）；与“肠病”组相比，“肺肠合病” 组大鼠的呼吸频率升高，每分钟通气量降低，潮气量降低（P﹤0.01）；与“肺病” 组相比，“肺肠合病”组大鼠的呼吸频率升高，每分钟通气量降低，潮气量降低 （P﹤0.05）。 5.胃肠功能检测：与空白对照组相比，“肺肠合病”组大鼠的肠推进率降低， 胃内残留率明显升高（P﹤0.01）；与“肠病”组比较，“肺肠合病”组大鼠的肠 推进率降低，胃内残留率明显升高（P﹤0.05）；与“肺病”组相比，“肺肠合病” 组大鼠的肠推进率降低，胃内残留率升高（P﹤0.01）。 6.光镜、电镜观察大鼠肺、胃肠组织的病理改变情况：（1）光镜观察：“肺 肠合病”组肺组织的正常结构被破坏，肺纹理排列紊乱，肺细胞变性坏死，出现 肿胀，局部充血、水肿、黏膜轻度糜烂，多数肺泡和段支气管以下较多的炎细胞 浸润，肺间质内有大量纤维组织增生，组织内有大量单核细胞、淋巴细胞、嗜酸 性粒细胞等细胞浸润。胃肠组织表现为；肠黏膜上皮欠完整，腺体排列欠规则， 黏膜腺体破坏，黏膜及黏膜下大量炎细胞浸润。（2）电镜观察：“肺肠合病”组 大鼠肺细胞中出现了典型的细胞损伤结构，相邻细胞间隙增宽，细胞明显萎缩， 内质网扩张呈大囊泡，线粒体肿胀，形态不规则；肠细胞出现了典型的细胞损伤 结构，线粒体肿胀，形态不规则，胃肠细胞表面微绒毛减少或消失，纤维隔多宽 大且致密，边缘平直。 7.肺肠菌群检测：与空白对照组比较，“肺肠合病”组大鼠肺部需氧菌和真 菌数升高，厌氧菌变化不明显（P﹤0.01）；肠道需氧菌和大肠杆菌升高，厌氧菌、 真菌、类杆菌和双岐杆菌降低（P﹤0.01）。与“肠病”组比较，“肺肠合病”组 大鼠肺部需氧菌和大肠杆菌数升高（P﹤0