艾滋病检测技术规范HIV抗体检测章节月.pptVIP

艾滋病检测技术规范HIV抗体检测章节月.ppt

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(优选)艾滋病检测技术规范年版HIV抗体检测章节年月 当前第1页\共有34页\编于星期六\10点 HIV抗体检测 HIV抗体检测的目的 HIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查: 当前第2页\共有34页\编于星期六\10点 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势,包括各类高危人群、重点人群和一般人群。 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况,包括临床检测、自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV,包括献血员筛查和原料血浆筛查。 HIV抗体检测的目的 当前第3页\共有34页\编于星期六\10点 1、根据目的选择检测方法及检测策略。 2、严格遵守实验室SOP。 3、筛查试验阳性,须作确证实验。 4、筛查试验阴性,不应做确证实验。 5、筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。 HIV抗体检测的要点 当前第4页\共有34页\编于星期六\10点 以诊断为目的的检测策略 常规HIV抗体检测分为筛查试验(包括初筛和复检)和确证试验 当前第5页\共有34页\编于星期六\10点 筛查试剂 必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂,其中酶联免疫试剂应批批检合格。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。 当前第6页\共有34页\编于星期六\10点 筛查样品 HIV抗体筛查可采用血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和尿液样品。 当前第7页\共有34页\编于星期六\10点 筛查方法 酶联免疫吸附试验(ELISA) 化学发光或免疫荧光试验 快速检测(RT)及其它检测试验 明胶颗粒凝集试验(PA) 免疫渗滤试验 免疫层析试验 当前第8页\共有34页\编于星期六\10点 (1)酶联免疫吸附试验(ELISA) 可使用血液、唾液、尿液样品,ELISA多为单纯HIV抗体检测试剂。HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体。HIV抗原或抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶标记的HIV抗原或抗体,加底物显色,用酶标仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。 当前第9页\共有34页\编于星期六\10点 酶联免疫吸附试验(ELISA) 优点:准确性高、价格低廉、判断结果标准客观、结果便于记录和保存 用途:流行病学监测及临床大量标本的检测 当前第10页\共有34页\编于星期六\10点 (2)化学发光或免疫荧光试验 采用发光或荧光底物,既可检测抗体,也可联合检测抗原抗体。HIV抗原或抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原或抗体,加发光或荧光底物,用发光或荧光仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。 当前第11页\共有34页\编于星期六\10点 (3)快速检测(RT)及其它检测试验 明胶颗粒凝集试验(PA):是HIV血清抗体检测的一种简便方法。将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体,与待检样品作用。当待检样品含有HIV抗体时,明胶颗粒与抗体发生凝集反应,根据凝集情况判读结果。PA试剂有两种:同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。 免疫渗滤试验:斑点ELISA和斑点免疫胶体金(或胶体硒)快速试验:均以硝酸纤维膜为载体,HIV抗原点状固定在膜上,加待检样品。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10分钟以内。有效试验的质控点必须显色。 免疫层析试验:以硝酸纤维膜为载体,HIV抗原线状固定在膜上,待检样品(血液或唾液)沿着固相载体迁移,阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带。有效试验的质控带必须显色。 当前第12页\共有34页\编于星期六\10点 优点:试验简便快速,不需专门设备和人员培训,适用于应急检测、门诊急诊检测。一般可在10~30分钟内得出结果。 缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保存。 当前第13页\共有34页\编于星期六\10点 全血样品 加50ul样品于样品垫中 手指血方法 静脉血方法 加一滴缓冲液 15分钟内读取结果 硒标法图示 当前第14页\共有34页\编于星期六\10点 筛查程序 初筛试验 根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛检测, 对呈阴性反应的样品,可出具HIV抗体阴性(-)报告;对呈阳性反应的样品,需要进一步做复检试验和确证试验。 当前第15页\共有34页\编于星期六\10点 筛查程序 复检试验 对初筛呈阳性反应的样品,应使用原有试剂和另外一种不同原理(或厂家)的试剂,或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验。 如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂,则复检必须包括一种抗原

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