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第
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《生物科高考实验部分主干知识精选》
4—1 分子与细胞(实验)
原理: ① 甲基绿能把 DNA染成绿色, 吡罗红使 RNA染上红色;
② 盐酸能改变细胞膜的通透性, 加速染色剂进入细胞, 同时使染色体中的 DNA与蛋白质分离,以利于染色。
步骤 器材与试剂 作用与原理
① 将牙签刮下的口腔上 ① 0.9% 的 NaCl 溶液:防止
⑴ 制片
皮细胞置于载玻片上 0.9%
细胞破裂,维持细胞形态。
1.观察DNA、
的 NaCl 溶液滴
② 载玻片烘干
② 烘干:使细胞固定在载玻
片上
盐酸能改变细胞膜的通透性, 加速染色剂进入细胞, 同时使
RNA
在 细
胞 中
⑵ 水解 8%HCl 中 30℃保温 5 分钟
用蒸馏水缓流冲洗 10 分
染色体中的 DNA与蛋白质分离,有利于染色。
的 分 ⑶ 冲洗
洗去浮色
钟
布
⑷ 染色
2 滴吡罗红甲基绿染色 5 甲基绿使 DNA染上绿色分钟 吡罗红使 RNA染上红色
⑸ 观察 显微镜下观察:先低倍镜后高倍镜
实 验 结果
实 验 结论
细胞核区域染成绿色,细胞质区域染成红色
说明: DNA主要分布在细胞核中, RNA主要分布在细胞质中
2.1
可 溶
性 还
原 糖
的 鉴
对比 DNA + 二苯胺 → (沸水浴加热) 蓝色
1、什么是还原性糖:
还原性糖:有还原性基团——游离醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。
非还原性糖:淀粉、纤维素、蔗糖、糖元。
2、还原性糖 + 斐林试剂(班氏试剂)→ (水浴加热)砖红色沉淀
(实质:还原性糖将 Cu(OH)2 还原为砖红色的 Cu2O)
步骤 操作方法
含还原糖较高的植物材料;
定 ⑴选材
⑵ 制 备 组织液
材料颜色白色或近于白色 (目的是避免遮掩实验本身产生的颜色)
制浆→过滤→取液
⑶ 呈 色 反应
结果:颜色变化
① 加入组织样液 2ml
② 加入刚配好的斐林试剂 1ml
③ 50-60 ℃温水浴加热 2 分钟
斐林试剂的甲液( 0.1g/mL 的氢氧化钠) 和乙 液
(0.05g/mL 的硫酸铜)等量混合均匀后,立即生成淡蓝色的 Cu(OH)2 沉淀, Cu(OH)2 与还原糖在加热条件下,先变棕色,最后生成 砖红色 Cu2O沉淀。
1、脂肪
+
苏丹Ⅲ
→
(2-3 分 钟) 橘黄色
2、脂肪
+
苏丹Ⅳ
→
(1 分钟)红色
2.2
脂 肪
的 鉴
步骤 操作方法
方法一 花生子叶匀浆 + 3 滴苏丹Ⅳ→ (2-3 分钟)
红色
定 方 法
二
)取材 花生种子浸泡,切成薄片
)制片 取最薄的切片,滴加 2 滴苏丹Ⅲ, 1-2 滴 50%
酒精去浮色,制成临时装片。
)观察 显微镜下观察被染成橘黄色的脂肪颗粒
2.3
蛋 白
蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色反应
( 双缩脲( H2NOC-NH-CON2)H在碱性环境下能与铜离子作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应 )
步骤 操作方法
(1)取材 鲜肝提取液或豆浆、牛奶(或蛋清)
① 样液中县加双缩脲试剂 A液( 0.1g/mL 的氢氧化钠
质 的 (2)呈色反鉴定 应
结果:颜色变化
溶液) 2ml。先加 A液目的是创设一个碱性环境。
② 加双缩脲试剂 B 液( 0.01g/mL 的硫酸铜溶液) 3~ 4 滴。B 液不能过量,原因是:过量会与 Cu(OH)2 反应生成蓝色,遮掩反应本身的颜色。
出现紫色反应
3.用显 微
目镜 安装在镜筒上端, 也叫接目镜。 在目镜上方刻有 5×、10×、20×等为放大倍数。从外表上看,镜头越长放大倍数越低。
安装在转换器上,物镜上所刻 8×、10×、40×等就是放大
镜 观 物镜察 多
种 多
样 的 放大
细胞 倍数
倍数,习惯上把 10- 20 倍的叫做低倍物镜; 40-60 倍的叫做高倍物镜; 90- 100 倍的叫做油镜。从形态上看,接物镜越长,放大倍数越高。
显微镜放大倍数是指物体的长度或宽度的放大倍数。 计算方法为接目镜放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。
成像 显微镜成的是倒像,即“ b” 在显微镜下看到的是“ q”
1、对光 2 、标本放在载物台上,正对通光孔 3 、转动粗准低倍 焦螺旋,使镜筒缓慢下 降,直至物镜接近盖玻片 4 、左眼镜的 看目镜内,反向转动粗准焦螺旋 升高镜筒,直到看到物像 5 、使用 调节细准焦螺旋使物像清晰。
高倍 1、低倍镜下看清物像 2 、移动玻片,使所需观察的部分移
视野范物镜与玻片间视野亮清晰物像大围距离度度小大
视野范
物镜与玻片间
视野亮
清晰
物像大
围
距离
度
度
小
大
大
亮
低
小
小
小
暗
高
大
对比 低倍镜
高倍镜
健那绿染液是专一性染线粒体的 活细胞
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