铁皮石斛组织培养..ppt

铁皮石斛 组织培养 B1小组准备素材 铁皮石斛的组织培养 铁皮石斛，为兰科多年生附生草本植物。生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。一般均能耐－5℃的低温。石斛可分为黄草、金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。 铁皮石斛的组织培养技术路线 外植体 丛生芽 培养基 生根发育 完整植株 蔗糖：30g 琼脂：6.8g 初代培养基的设计 MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂6.8%【pH值5.2~5.6】 MS母液： I-V50ml,5ml,5ml,5ml 5ml。 激素母液：BA10ml,NAA5ml 蔗糖：30g 琼脂：6.8g 土豆汁150ml 继代培养基的设计 MS+BA0.5ml+NAA0.2+土豆汁10%~20% 【pH值5.2~5.6】 取MS母液： IV50ml,5ml,5ml,5ml,5ml; 激素母液：BA5ml,NAA2ml NAA BA IAA 增殖培养将建立的无菌系中的小苗转入增殖培养基中进行增殖培养。增殖培养基以MS为基本培养基，添加不同浓度的生长调节剂BA、NAA、IAA、IBA及土豆汁和香蕉汁等附加物。 土豆汁 香蕉汁 IBA 蔗糖：30g 琼脂：6.8g 香蕉汁：200ml 活性炭：20g 生根培养基的设计 1/2MS+NAA0.2~0.5mg/L+香蕉汁20%+活性炭2.0%【pH值5.2~5.6】 取MS母液： IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml; 激素母液：NAA2~5ml Your Text here 生根培养将丛生芽无菌操作切下单株放在生根培养基中于适宜条件下培养，约1~2周后即生根，以长成完整植株。 优选1年生铁皮石斛植株上生长健壮的茎段 外植体的选择 接种小芽苗多易于在苗基部形成丛生芽。 苗的高度为1～2cm时,丛生芽增殖倍数最高数。 生长发育健壮苗优先 1 2 3 外植体的处理 Text 1 Text 2 Text 3 摘去叶片和膜质叶鞘，剪成约2cm长带节的小段。 用洗洁剂清洗后置流水下冲20~30 min。 在超净工作台上用75%的酒精消30s0.1%HgCl2灭菌5min后，用无菌水冲洗5~6次，放入垫有干无菌滤纸的培养皿中，以吸去多余水分，茎段两端各切0.2~0.3cm。 接种实验 一、接种准备工作 1、超净工作台开紫外灯照射10-20min送风 2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作为材料） 3、工具消毒 二、接种操作 1、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段2cm 2、接种环烧红，沾一下培养基 3、镊取茎段插于培养基中 4、封口、标记 各时期的培养条件 茎段的诱导时间在5~11天之间 培养温度23~25℃，光照强度2000lx，光照时间10h/d 参考文献 [1]郑宽瑜,邓君浪,赵培快繁技术体系研究[J].云南农业科技,2009,(S2):57-59。 [2]周根余,谢薇,程磊.影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素[J].江西科学,1999,17(4):231-235. [3]叶纪沟.铁皮石斛试管苗的人工栽培研究[J].中国药业,2001,10(1):53。 [4]李铭宗.铁皮石斛的生物学特性和人工栽培[J].福建热作科技,1999,24(1):29-31。 [5]张明,夏鸿西,朱利泉,等.石斛组织培养研究进展[J].中国中药杂志,2000,25(6):323-326。 B1小组成员展示结束