巢式PCR-RFLP检测rs9263726位点的实验研究.docx

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2022-06-20 发布于湖北
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巢式PCR-RFLP检测rs9263726位点的实验研究【摘要】目的：使用巢式PCR-RFLP技术准确、简便地检测rs9263726位点基因多态性，以替代HLA-B* 58:01基因分型，用于别嘌呤醇个体化用药指导。方法：采集口腔上皮细胞样本，设计rs9263726位点的外、内引物，经巢式PCR扩增得到片段上游含有rs9263726位点且下游含有一个内对照酶切位点的PCR产物，然后通过限制性核酸内切酶消化PCR产物制作酶切图谱进行分型，最后通过三种基因型随机测序，证明分型方法的准确性。结果：所有受检样本均可通过特征条带清晰分辨基因型，随机样品测序结果与本法检测结果完全一致。100例受检样本