miR448通过下调SPACRL1促进口腔鳞癌增殖和迁移能力.PDF

第38卷第6期 南京医科大学学报（自然科学版） 2018年6月 ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJING（NaturalScience） ·827 · miR⁃448通过下调SPACRL1促进口腔鳞癌增殖及迁移能力的 研究 李长春，沈林汉，刘 玲，魏 玮，李宏卫* 南京医科大学口腔医学研究所，南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科，江苏 南京 210029 ［摘 要］ 目的：探讨微小RNA⁃448（miR⁃448）对口腔鳞癌细胞增殖调控作用，筛选并验证相关靶基因。方法：RT⁃qPCR检测 miR⁃448在人口腔鳞癌临床标本中表达；miR⁃448抑制物转染口腔鳞癌细胞系Cal⁃27细胞，MTT实验研究miR⁃448抑制物对细 胞增殖能力的影响；细胞划痕实验检测miR⁃448抑制物对细胞迁移能力的影响。3种基因预测软件筛选出miR⁃448的可能下 游靶基因，实验验证miR⁃448对靶基因的调控作用。结果：RT⁃qPCR分析发现miR⁃448在15对OSCC组织内表达显著升高。与 对照组相比，转染miR⁃448抑制物后，Cal⁃27细胞增殖及迁移能力明显下降；Westernblot、RT⁃qPCR结果显示SPARCL1基因的 表达量升高；荧光素酶报告基因实验确定miR⁃448与SPARCL1基因在3′UTR区存在位点结合。结论：miR⁃448在人口腔鳞癌 临床标本中呈高表达。miR⁃448与SPARCL1⁃3′UTR的结合，下调SPARCL1的表达，在口腔鳞癌细胞中发挥癌基因的作用，促 进肿瘤细胞的增殖与迁移。 ［关键词］ 口腔鳞癌；miR⁃448；SPARCL1；增殖 ［中图分类号］ R739.85 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2018）06⁃827⁃06 doi：10.7655/NYDXBN miR⁃448 promotestheproliferationandmigrationoforalsquamouscellcarcinomaby down⁃regulatingSPACRL1 LiChangchun，ShenLinhan，LiuLing，WeiWei，LiHongwei* Jiangsu Key Laboratory of Oral Diseases，Department of Oral and Maxillofacial Surgery，the Affiliated StomatologicalHospitalofNMU，Nanjing210029，China ［Abstract］ Objective： ToinvestigatetheeffectofmiR⁃448ontheproliferationoforalsquamouscellcarcinoma，andtoscreenand verifytherelvelantgenes.Methods：UsingRT⁃qPCRtostudytheexpressionofmiR⁃448inhumanOSCC.ThenmiR⁃448inhibitorwas transfectedintoOSCCcelllineCal⁃27cells，andtheeffectsofmiR⁃448inhibitoronproliferationandmigrationofOSCCweredetected byMTTassayandscratchtest.Inaddition，wescreenedthetargetgeneofmiR⁃448 bythreegenepredictionsoftware，andverifythe regulationofmiR⁃448ontargetgenes.Results：WefoundthatmiR⁃448wassignificantlyincreasedin 15pairsofOSCCtissuesbyRT⁃ qPCRanalysis.Comparedwiththecontrolgroup，theproliferationandmigrationofCal⁃27 cellsweresignificantlydecreasedafter transfectedwithmiR⁃448inhibitor.TheexpressionofSPARCL1genewasincreaseddetecte