第十二章的生物合成转录详解.ppt

开始转录 (Pribnow box) T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 1 -30 -50 10 -10 -40 -20 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 原核生物启动子的保守序列 T T G A C A A A C T G T -35 区 RNA-pol辨认位点 (recognition site) 5? 5? RNA聚合酶保护区 结构基因 3? 3? 当前第31页\共有75页\编于星期六\7点 原核生物转录起始区的一致性序列 当前第32页\共有75页\编于星期六\7点 被RNA聚合酶辨认的区段就是位于转录起始点-35区的TTGACA序列。 RNA聚合酶与该区结合后，即滑动至-10区的TATAAT序列（Pribnow盒），并启动转录。 当前第33页\共有75页\编于星期六\7点 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 当前第34页\共有75页\编于星期六\7点 ⑵ DNA局部双链解开。 ⑴ RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合。 ⑶ 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物。 RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 2. 转录的起始过程： 当前第35页\共有75页\编于星期六\7点 ?因子从全酶上脱离，余下的核心酶继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合RNA。 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 （二）转录延长 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 当前第36页\共有75页\编于星期六\7点 RNA转录的延长 当前第37页\共有75页\编于星期六\7点 转录空泡(transcription bubble)的形成 当前第38页\共有75页\编于星期六\7点 原核生物转录过程中的羽毛状现象 当前第39页\共有75页\编于星期六\7点 RNA转录合成的终止机制有两种： 1．依赖Rho因子的转录终止： 由终止因子（?因子）识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。 （三）转录终止 当前第40页\共有75页\编于星期六\7点 ATP 依赖 Rho因子的转录终止 当前第41页\共有75页\编于星期六\7点 模板DNA链在接近转录终止点处存在相连的富含GC和AT的区域，使RNA转录产物形成寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。 2．非依赖Rho的转录终止： 当前第42页\共有75页\编于星期六\7点 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构 当前第43页\共有75页\编于星期六\7点 茎环结构使转录终止的机理 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 当前第44页\共有75页\编于星期六\7点 二、真核生物的转录过程 1. 转录起始的上游区段： 真核生物的转录起始点上游-25bp区也存在一段富含TA的顺序，被称为Hogness盒或TATA盒，通常认为是启动子的核心序列。 （一）转录起始 当前第45页\共有75页\编于星期六\7点 除此之外，在真核生物中还可见到其他带共性的序列，如CAAT盒及GC盒等。 在远离受控基因处存在的，能够增强基因转录活性的调控序列称为增强子（enhancer）。 当前第46页\共有75页\编于星期六\7点 真核生物启动子保守序列 当前第47页\共有75页\编于星期六\7点 真核生物转录起始时，首先由TFⅡD的TBP亚基识别并结合TATA盒，然后在其他转录因子的配合下，与RNA聚合酶Ⅱ组装形成转录起始前复合物(pre-initiation complex, PIC)。 2. 转录起始过程：