上海地区草莓枯萎病病菌的鉴定及对4类杀菌剂的敏感性-《江苏农业科学》(2020年4期).docx

龙源版权所有 上海地区草莓枯萎病病菌的鉴定及对4类杀菌剂的敏感性作者：许媛 成玮 颜伟中 肖婷 王建华 吉沐祥 杨敬辉来源：《江苏农业科学》2020年第04期 摘要：为阐明上海地区草莓枯萎病病原菌分类地位及对药剂的敏感性。运用真菌形态学和分子生物学分类方法，对上海地区不同草莓种植区分离得到的34株病原菌进行鉴定，并采用菌丝生长速率法测定了病原菌群体对4种不同作用机制杀菌剂的敏感性。结果表明，34株病原菌均鉴定为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum），病原菌群体对多菌灵、咪鲜胺、戊唑醇和吡唑醚菌酯的抑制中浓度（EC50）范围分别为0.302 7～0.556 2、0.001 1～0.148 2、0.036 1～0.299 7、0.036 8～1.721 6 mg/L。病原菌群体对多菌灵和戊唑醇的EC50比值分别为1.8、8.3，而对咪鲜胺和吡唑醚菌酯的EC50比值分别达134.7、46.8。上海市域范围内不同地区间的尖孢镰刀菌对同种杀菌剂的敏感性之间无显著性差异，对4类不同作用机制杀菌剂之间的敏感性也无显著相关性（P>0.05）。本研究结果明确了上海地区草莓枯萎病病原菌的分类地位，可以为合理选用杀菌剂防治病害及病原菌抗药监测提供参考。 关键词：草莓枯萎病病菌;病原菌鉴定;多菌灵;戊唑醇;咪鲜胺;吡唑醚菌酯;敏感性 中图分类号： S436.68+ 4文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2020）04-0115-06 收稿日期：2018-12-26 基金项目：江苏省第五期“333”工程培养基金（编号：BRA2017149）;上海市农业委员会示范推广计划[编号：沪农推字（2015）第2-7号];江苏省农业工程[编号：SXGC（2017）214]。 作者简介：许媛（1991—），女，江苏兴化人，硕士，助理研究员，主要从事植病生防和化保方面的研究。Tel：（0511E-mail：xyyuan007@163.com。 通信作者：杨敬辉，博士，研究员，主要从事农作物病害防控方面的研究。Tel：（0511E-mail：yjhnn32@126.com。 上海地区草莓种植面积约为2 000 hm2，主要分布在嘉定、青浦、金山和浦东等地区。近几年，在上海地区部分大棚草莓移栽初期土传病害危害严重，尤其以枯（黄）萎病为盛。发病植株地上部分新生心叶呈黄绿色、不对称，呈大小叶状，地下根呈黑褐色，严重时整株枯死，对大棚草莓的产量和品质造成了极大的影响。由于该病田间危害症状与黄萎病极其相似，仅从田间表现形态上难以准确区分。因此，本研究对从上海地区草莓主产区显枯（黄）症草莓植株上分离得到病原菌群体进行鉴定，并检测病原菌群体对4种不同作用机制杀菌剂的敏感性，旨在为探明上海地区草莓枯萎病病原菌群体的分类地位，明确病原菌群体对不同作用机制杀菌剂的敏感性现状，以及为科学防控和抗药性监测提供参考。 1材料与方法 1.1供试培养基 马铃薯琼脂培养基（potato dextrose agar，简称PDA），用于病原菌的分离、保存、鉴定和药剂敏感性测定。 1.2菌株采集与分离 于2016年9月草莓移栽初期，从上海市嘉定区、青浦区和金山区大棚草莓园内采集初发病症的新鲜草莓根部组织，洗净并用乙醇表面消毒后，采用常规的组织分离方法[1]，每个大棚分离3～5株，经单孢纯化后共得到34株菌株，将各菌株编号并保存于PDA斜面上，置4 ℃冰箱保存备用。 1.3供试药剂 97.09%多菌灵原药，由上海升联化工有限公司提供;95.2%咪鲜胺，由江苏辉丰农化股份有限公司提供;95%戊唑醇，由江蘇盐城利民农化有限公司提供;95%吡唑醚菌酯，由德国巴斯夫股份（中国）有限公司提供。多菌灵用0.1 mol/L盐酸溶解，其余原药均用丙酮溶解，各药剂均配制成10 000 mg/L的母液。99%水杨肟酸（salicylhydroxamic acid，简称SHAM），购自Sigma-Aldrich公司，用甲醇配制成20 000 mg/L 的母液。所有母液均置于4 ℃保存备用。 1.4病原菌形态观察 将经单孢分离得到的菌株移置于PDA培养基上，置于25 ℃黑暗条件下培养，并观察其菌落形态、颜色、质地等特征。 1.5病原菌的致病性测定 1.5.1病原菌分生孢子液的制备 沿病原菌（25 ℃、PDA上培养5 d）边缘打取直径为4 mm的菌饼，每个菌株分别挑取4块菌饼置于装有80 mL 马铃薯液体培养液的体积为250 mL的三角瓶中，每个病原菌接种1个三角瓶，置于25 ℃、120 r/min 条件下振荡培养5 d，培养液经双层无菌纱布过滤后，于显微镜下用血球计数板计数，并用无菌水稀释菌液分生孢子浓度至1×105～3×1