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电泳技术的应用及发展 摘要：电泳技术是利用粒子所带电荷不同或荷质比不同，在同一电场中迁移时速率不同的原理而对物 质进行分离的一种技术。该技术具有样品用量少、设备简单、操作简便、分辨率高等特点，近年来被广泛应用于各种领域。本文对电泳技术的影响因素和应用展开综述。 关键字：电泳 影响 综述 Abstract: Electrophoresis technology is a technology that separates matter by using the principle of different charges or different charge-to-mass ratios of particles and different rates when migrating in the same electric field. This technology has the characteristics of small sample amount, simple equipment, simple operation and high resolution, and has been widely used in various fields in recent years. In this paper, the influencing factors and applications of electrophoresis technology are reviewed. Keywords: Electrophoresis Effects Review 在电场作用下，带电粒子向着与自身电性相反的电极方向移动，这种现场称为电泳（electrophoresis, EP）。不同的粒子所带的电荷不同或者荷质比不同，在同一个电场迁移时，相同时间内，迁移的距离不同，从而相互分离开，这种分离的技术即电泳技术。 近年来随着基因组学、蛋白质组学的发展，许多新的电泳技术也随之孕育而生。单细胞凝胶电泳、变性梯度凝胶电泳、双向电泳、毛细管电泳技术的产生。使得DNA及蛋白质在分离和测量方法上有了更精确的提高。另外高效毛细管电泳技术被认为是当今分离生物分子的最重要工具，已被列为人类基因组计划首选分离DNA片段的方法。同时这些先进的电泳技术在现代生物医学研究中也起到了非常重要的作用，本文即对的电泳技术的应用与发展加以综述。 1 影响电泳的因素 pH值 电泳介质的pH值是决定分离能否成功的关键因素之一，不同的样品分离所需pH值也不同。溶液的pH值选择合适有利于加大不同待分离样品所带静电荷的差别，有利于实现样品的有效分离。 缓冲液种类及离子强度 在同一pH值下，缓冲试剂种类不同，所带来的分离效果也会不同。缓冲液的离子强度也会对样品的分离效果产生影响。离子强度升高时，样品出峰的时间会推迟，分析 时间延长，同时会产生较多的焦耳热，会引起基线不稳[3]。 电极电位 在毛细管电泳分离中，施加在电极两端的电位也是影响分离效果的重要因素。两端的电压较高，有利于快速高效分离。相对较高的电压，有利于缩短分离分析的时间以及提高样品的分离度。 电渗现象 电泳的实际距离是电泳距离与电渗距离的矢量和。科学家对于电渗的认识存在一个逐渐加深的过程[4]。现在一般认为电渗对于分离是不利的，应该加以控制。 其它影响因素 另外，还有一些其它的具体因素影响着电泳分离的效果：①支持介质。②样品性质。③进样方式。例如，在毛细管电泳检验分析药物时，徐中其等人采用了压力辅助电动进样的方式使检验的灵敏度进行了大幅度提高。 2.电泳技术的分类及应用 2.1 单细胞凝胶电泳 单细胞凝胶电泳(Single Cell Gel Electrophoresis Assay , SCGE)又称彗星试验( Comet Assay )。它的分离原理是根据当各种内源性或外源性DNA损伤因子诱发DNA链断裂时，DNA的超螺旋结构被破坏，在细菌裂解液作用下，细胞内 的蛋白质、RNA等扩散到细胞裂解液中，而核DNA由于分子量过大停留在原位。在中性条 件时，残留的DNA片段可进人凝胶发生迁移，这时用碱处理或在碱性电解质条件下， DNA会发生解螺旋，释放出DNA断裂片段，由于这些DNA片段的分子量很小 , 在电泳过程中会离开核DNA向阳极移动 , 形成彗星状的图像;而未损伤的DNA部分保持球形。在一定条件下，DNA的迁移距离(彗星尾长) 和DNA的含量(荧光强度)与DNA损伤呈线性相关 , 通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移距离可以推测出DNA的损伤程度。由于SCGE具有敏感、简便、 快速、低耗等优点 , 因此被广泛应用在DNA的损伤与修复、遗传毒理、环境监测以及氧化应激和细胞凋亡等研究中。 2.2?变