薄层色谱分离原理 .docxVIP

PAGE PAGE 1 薄层色谱分离原理 在平面介质上举行组分分别的色谱法叫平面色谱。平面色谱又分为纸色谱法和薄层色谱法两类。纸色谱法是用纸作为固定相或载体的平面色谱法。 薄层色谱法(TLC)是用载板，如玻璃、金属或塑料薄片，上涂布或烧结一薄层物质作为固定相的液相色谱法。采纳不同的固定相，可以举行吸附、分配、离子交换和分子排阻色谱分别。应用最多的是以硅胶为固定相的吸附薄层色谱法。薄层色谱与纸色谱相比，分析时光较短(普通为10min～1h)，分别能力较强，检出敏捷度较高，20世纪60年月以来已取代了部分纸色谱的工作。又因为薄层色谱实现了仪器化，自动化程度提高，测定精度及敏捷度都有很大提高，至今仍弥漫活力。(一)薄层色谱分别原理薄层色谱的操作办法是取一块涂布有固定相(例如硅胶)细颗粒层(厚约0.25mm)的薄层板，把样品溶液点在薄层的一端离边缘一定距离处，将板置于层析缸中，使点有试样的一端浸入绽开剂(流淌相)中，因为薄层的毛细管作用，绽开剂沿着薄层慢慢升高，试样中的各组分沿着薄层在固定相和流淌相之间不断发生溶解、吸附、再溶解、再吸附过程。因为分配系数不同各组分在薄层上移动的距离不同，从而达到分别。绽开剂升高到一定距离时，将薄层板从层析缸中取出。假如组分图8-17薄层色谱图是有色的，就可以看到各个色斑，假如组分无色，要用物理的或化学的办法显色，得到一个薄层色谱图。图8-17是单个组分的薄层色谱图。图中原点是滴加试样的中央点，斑点是组分在绽开和显色后展现的近似圆形或椭圆形的色区。原点至溶质斑点中央之间的距离(ds)称为溶质迁移距离，原点至流淌相前沿之间的距离(dm)称为流淌相迁移距离。用比移值(Rf)表示斑点的位置：比移值Rf为溶质迁移距离与流淌相迁移距离的比值比移值乘100称为hRf, hRf=Rf×100Rf值与分配系数有关，利用Rf 的特征值可以对组分举行定性鉴定。影响Rf的因素主要有：溶质和绽开剂的性质，固定相的性质、温度、绽开方式和绽开距离等。惟独在彻低相同的条件下，Rf对于某一组分才是常数。因此常用相对照移值RiS来定性。相对照移值为组分与参比物质比移值之比在分析试样时，将试样与参考物质同时绽开，可以消退一些系统误差。