两种常见病毒检测方法的比较：酶联免疫吸附试验(ELISA)与聚合酶链式反应(PCR).pdf

附试验（ELISA）与聚合酶链式反应（PCR）

病毒是以细胞为宿主，并以该宿主细胞的代谢作为生存依据的生

物。由于其微小的体型和嗜生特性，病毒常常会潜伏在人体内多年，

甚至终身不愈。而这种情况会带来许多的健康问题以及社会问题。因

此了解病毒的相关信息是非常重要的。对于病毒检测来说，酶联免疫

吸附试验（ELISA）和聚合酶链式反应（PCR）是常见的方法。本文将

分析这两种方法的优缺点，以此帮助我们更好地了解它们的应用及其

适用范围。

一、酶联免疫吸附试验（ELISA）

ELISA是一种常见的病毒检测实验方法，适用于多种病原微生物、

细胞因子及荷尔蒙的检测。其操作简单、灵敏度高、准确性较好，并

且适用范围较广。

ELISA包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等多种形式，其

具体步骤如下：

将待检物质加入到已知化合物（即抗原或抗体）涂覆的孔板上；

2.孔板中的化合物与待检物质结合（如果是抗原与待测抗体结

合），形成复合物；

3.孔板洗涤去除未结合的化合物；

4.添加检测标签（如酶）标记的二抗（即特异抗体），与复合物

结合；

5.孔板再次洗涤去除未结合的标记化抗体；

6.加入显色试剂使结合的酶反应产生颜色。

ELISA方法包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等。

ELISA的优点：

1.ELISA方法灵敏度较高，能够检测到低浓度的病毒。

2.操作简单、快速、适用范围广泛。

3.具有良好的灵敏度和特异性。

4.ELISA试剂盒的制备和多孔板处理过程已成规模化生产，价格也

逐渐变得负担得起。

的缺点：

1.ELISA方法很难检测出病毒的亚型。

2.在复杂的样品里，ELISA方法可能出现假阴性或假阳性结果。

3.ELISA方法不适用于大型的病毒颗粒,或者是样品中含有被病毒

感染的细胞。

二、聚合酶链式反应（PCR）

PCR方法是在1983年由Mullis发明的一种可以扩增DNA序列的技

术。该技术对于病毒检测来说具有极高的灵敏度，能够在非常短的时

间内扩增目标DNA序列，并对其进行探测和测量。

PCR也分为定性和定量两种方式，其基本步骤如下：

1.样品前处理：如病毒RNA/DNA的提取、分离等。

2.扩增阶段：在PCR扩增液中加入反向引物和正向引物及

Taqpolymerase，使目标DNA序列得到扩增。

3.产物检测：通过PCR扩增结果判断反应阳性及阴性。

PCR方法具有如下优点：

方法适用于多种类型的病毒检测。

2.在短时间内可以扩增出目标DNA序列，并进行高灵敏度的检测。

3.PCR方法可以同时检测多个病原体。

4.PCR方法灵敏度较高，能够检测到极微量的病毒。

PCR方法的缺点：

1.需要较多的实验条件和设备。

2.PCR方法对于样品纯净度、稳定性非常敏感。

3.PCR试剂箱容易有污染，容易出现假阳性假阴性结果。

4.PCR卡特掉测购买成本高，也不太适合同步大规模病毒跟踪。

综上所述，ELISA和PCR两种方法各具优缺点。在实际的病毒检测

中，应根据具体的检测要求和条件来选择合适的方法。对于大规模病

毒检测，一般会采用ELISA方法；而对于特定病毒的检测，一般则会

采用PCR方法。