WS_T 635-2018尿中砷形态测定 液相色谱-原子荧光法.pdf

ICS 11. 020C 61Ws中华人民共和国卫生行业标准WS/T 635—2018尿中形态测定液相色谱-原子荧光法Determination of urinary arsenic speciationliquid chromatography-atomic fluorescence spectrometry2018 - 09 - 17 发布2019-03-01 实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发布 WS/T 635—2018言前本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准起草单位：北京市疾病预防控制中心、重庆市疾病预防控制中心、广东省疾病预防控制中心、安徽省疾病预防控制中心、北京朝阳医院、山西省疾病预防控制中心。本标准主要起草人：刘丽萍、王小艳、张妮娜、张洁、王晶、韦莹、李惠玲、郭舒岗、陈绍占、戴锐睿。I WS/T635—2018尿中形态测定液相色谱-原子荧光法1 范围本标准规定了测定尿中砷形态（亚砷酸盐[As（I）]、砷酸盐[As（V）]、一甲基砷（MMA）和二甲基砷（DMA））的液相色谱-原子荧光法。本标准适用于尿中砷形态（亚砷酸盐[As（I）]、砷酸盐[As（V）]、一甲基砷（MMA）和二甲基砷（DMA））的测定。2规范性引用文件下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理尿样按一定比例稀释后，以液相色谱进行分离，分离后的目标化合物在酸性介质下与硼氢化钾（KBH4）反应，生成气态砷化合物，用原子荧光光谱仪进行测定，保留时间定性，以峰高或者峰面积绘制标准曲线法定量。4仪器4.1玻璃器皿均需以硝酸溶液（1+4）浸泡24h，用水反复冲洗，最后用纯水冲洗干净。4.2液相色谱一原子荧光光谱联用仪。4.3pH计（精度0.01）。4.4电子天平（感量0.1mg）。4.5超声波清洗器。4.6离心机，转速≥8000r/min。4.7纯水制备仪。5 试剂1 WS/T635—20185.1实验用水及试剂要求：除非另有说明，本方法所用试剂均为优级纯，纯水为GB/T6682规定的一级水。5.2 盐酸（HCl，p=1.19 g/mL）。5.3氢氧化钾（KOH）。5.4硼氢化钾（KBH4）。5.5 磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4]。5.6甲酸（HCOOH，99%）。5.7标准物质：亚砷酸根（AsO3-），砷酸根（AsO43），一甲基砷（CH4AsO3），二甲基砷（C2H6AsO2）均为有证标准物质。6试剂配制6.1载流，盐酸溶液（7+93）量取70mL盐酸，用纯水稀释至1000mL。6.2还原剂（20g/L硼氢化钾溶液-3.5g/L氢氧化钾溶液）称取3.5g氢氧化钾溶解于900mL纯水中混匀，加入20g硼氢化钾，用纯水稀释至1000mL，混匀。6.3甲酸溶液（10+90)量取10mL甲酸用纯水稀释至100mL。6.4流动相（15mmol/L磷酸氢二铵溶液）称取1.98g的磷酸氢二铵溶解于1000mL纯水中，用甲酸溶液（10+90）调节pH至6.0，超声脱气5min，备用。6.5砷形态标准溶液配制6.5.1 砷形态标准储备溶液[p(As)=10.0 mg/L]：分别准确称取适量亚砷酸根、砷酸根、一甲基砷、二甲基四种砷形态标准物质，用纯水配制成含砷浓度为10.0mg/L的砷形态单标标准储备溶液，置于4℃冰箱中保存。6.5.2砷形态混合标准溶液[p(As)=1.0mg/L]：分别准确移取10.0mg/L的四种砷形态单标标准储备溶液1.00mL置于10mL容量瓶中，用纯水定容至刻度，现用现配。2 WS/T635—20186.5.3砷形态混合标准使用系列溶液[p(As)=0～100.0μg/L]：分别准确移取一定量的1.0mg/L砷形态混合标准溶液，用纯水逐级稀释成0.0μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L、100.0μg/L四种砷形态混合标准系列使用溶液，现用现配。7样品收集、运输和保存收集不少于10mL尿液，置于洁净的聚丙烯塑料或玻璃试管中，严密封口以防蒸发。现场收集尿样后，在4℃下保存运输；样品应该尽快测定，在4℃下可保存30d。8 分析步骤8.1试样的前处理取1mL均匀的尿样用纯水稀释3倍，用0.45μm水系滤膜过滤后上机测定。如果尿样中有沉淀，先将尿样离心10min（8000r/min），取一定量的上清液按以上方法测定。如果样品中砷形态浓度超过标准曲线上限，则将尿样按一定比例稀释后测定。8.2液相色谱参考条件8.2.1色谱柱条件：阴离子交换色谱柱（柱长250mm，内径4.1mm），或等效柱。阴离子交换色谱保护柱（柱长25mm，内径2