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流感病原学监测工作要求及实验室检测技术要点;?流感病原学概述
?流感病毒的核酸检测
?流感病毒的分离培养
?流感病毒的基因测序;病原学概述;;A 型流感病毒-亚型;流感病毒基因变异;人流感病毒分型;?流感病原学概述
?流感病毒的核酸检测
?流感病毒的分离培养
?流感病毒的基因测序;检测依据;呼吸道样品采集要求;;呼吸道病毒实验室检测流程;硅胶膜提取法;;核酸检测方法;荧光定量PCR仪;检测通道;注：不同批号间试剂盒组分不能互换 建议反复冻融不超过5次;曲线扩增异常;二、反应体系存在气泡;;;;六、扩增曲线翘尾;七、扩增曲线出现尖峰;;;;实验操作注意事项;标本保存;影响核酸检测灵敏度的因素;?流感病原学概述
?流感病毒的核酸检测
?流感病毒的分离培养
?流感病毒的基因测序;? 细胞培养：MDCK传代细胞系
? 鸡胚培养：9-11日龄SPF接胚
? 动物实验：SPF小鼠、SPF鸡等??验动物
? 毒株鉴定方法：HA-HI试验
? 病毒纯化方法：细胞噬斑试验、鸡胚有限稀释法等
? 应用：基因测序、抗体水平监测、疫苗候选株筛选等;?流感病原学概述
?流感病毒的核酸检测
?流感病毒的分离培养
?流感病毒的基因测序;? 一代测序：低通量，读长700bp-900bp，金标准
特异性引物进行PCR扩增测序
? 二代测序：高通量，读长75-100-150-300-600bp不等 构建测序文库，边合成边测序方法
对标签序列和reads（DNA簇）进行测序
? 三代测序：高通量，读长最长
构建测序文库，单分子测序，电信号转化为碱基序列流感病原学监测工作要求及实验室检测技术要点;?流感病原学概述
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? 鸡胚培养：9-11日龄SPF接胚
? 动物实验：SPF小鼠、SPF鸡等??验动物
? 毒株鉴定方法：HA-HI试验
? 病毒纯化方法：细胞噬斑试验、鸡胚有限稀释法等
? 应用：基因测序、抗体水平监测、疫苗候选株筛选等;?流感病原学概述
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特异性引物进行PCR扩增测序
? 二代测序：高通量，读长75-100-150-300-600bp不等 构建测序文库，边合成边测序方法
对标签序列和reads（DNA簇）进行测序
? 三代测序：高通量，读长最长
构建测序文库，单分子测序，电信号转化为碱基序列
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