牙鲆变态期间核酸、总蛋白的变化及其与生长的关系-《江苏农业科学》(2014年3期).docx

龙源版权所有 牙鲆变态期间核酸、总蛋白的变化及其与生长的关系作者：佟雪红等来源：《江苏农业科学》2014年第03期 摘要：研究牙鲆变态期间核酸、总蛋白及其比值的变化，并确定其与生长的关系。结果显示，DNA浓度在22～32日龄保持相对稳定，在32～34日龄急剧升高，在36日龄达到最高。RNA浓度在24日龄升至峰值，在32日龄降至最低，之后呈先升高再下降的趋势。总蛋白浓度在22～29日龄呈升高趋势，之后先降低再上升。DNA、RNA含量及总蛋白含量在变态期间均保持先升高后降低再升高的趋势，在32～36日龄快速增长。RNA/DNA比值在22～24日龄呈上升趋势，然后下降直至32日龄，之后先上升后下降，并在36日龄达到最低值（2.27）。Protein/DNA比值在29日龄达到最高值（61.97），之后先下降后上升。RNA、DNA浓度及总蛋白浓度与体长和体重有明显的线性关系。结果表明，牙鲆变态高峰期前的生长以细胞增大为主，变态后的生长以细胞增殖为主，RNA、DNA及其比值可以从微观细胞水平上指示仔稚鱼的生长。 关键词：牙鲆；变态；核酸；RNA/DNA；Protein/DNA 中图分类号：S917.4 文献标志码：A 文章编号：1002-1302（2014）03-0171-03 鱼类在养殖过程中通常采用测定体长和体重的方式确定生长状况。但早期发育阶段，仔稚鱼形体较小，精确测定其形态指标比较困难，降低了应用体长或体重来评价生长的可行 性。有研究表明，生化指标能够准确地检测到鱼类生长的细微变化和食物分布的波动[1]。因此，在通過传统方法不能度量出鱼类生长的变化时，采用有效的生化指标来评价鱼类的生长是非常重要的。鱼类的生长依赖于蛋白质的持续合成，RNA和DNA在仔鱼生长和发育中也有重要作用。RNA参与合成蛋白质，控制着细胞和核糖体的体积，进一步影响细胞的生长率。DNA是生物的遗传物质，DNA浓度高表明单位组织中细胞数目多，RNA/DNA是体内蛋白质合成的体现。根据RNA/DNA比值可以估算出鱼类的生长速度[2-4]。 目前已在隆头鱼（Tautoga Onitis）[5]、黑线鳕（Melanogrammus aeglefinus）[6]、东方蓝鳍鲔（Thunnus orientalis）[7]、草鱼（Ctenopharyngodon idellus）[8]、红鳍东方鲀（Takifugu rubripes）[9]等鱼中进行了核酸指标与生长参数的研究，结果表明RNA/DNA比值是评价养殖鱼类生长潜能的敏感参数。在鱼类的体长、体重较难测量时，可以采用核酸指标来度量生长状况。 牙鲆在我国俗称牙片、偏口，是名贵的海产鱼类，又是重要的海水增养殖鱼类之一，经济价值较高。在早期发育阶段，牙鲆仔鱼要经历变态过程，身体逐渐偏转90°，导致脑颅及脑腔变形，同时生活方式也从浮游型转变为底栖埋伏型[10]。变态期往往伴随着营养危机和高死亡率，是鲆鲽鱼类早期发育阶段的关键期，并决定着年产量和经济收益[11]。探究变态期仔稚鱼的生长发育，了解鱼苗的生理状况，有助于优化养殖管理，提高成活率。因此，本研究分析变态期间牙鲆仔稚鱼DNA、RNA和总蛋白的变化规律，确定上述生化指标跟生长的数量关系，以期建立从微观细胞水平上评价仔稚鱼生理状态的方法，为发育生理等方面的深入研究提供基础资料。 1 材料与方法 1.1 样品采集和保存 试验所用牙鲆鱼苗取自江苏省赣榆县海头镇养鱼场，培育时水温16～19 °C，溶氧7.9～8.7 mg/L，盐度3.1%～3.3%。分别在22、24、28、29、32、34、36日龄上午投饵前定点定时取样，按照鱼苗大小随机取一定量的样品用于测定RNA、DNA浓度及总蛋白浓度，样品麻醉后快速保存于液氮中备用。在测定DNA、RNA浓度及总蛋白浓度前，于半解冻的状态下用游标卡尺和电子天平测定体长（BL）、全长（TL）及体重（BW）。 1.2 核酸和总蛋白的测定 按照Buckley等[12]和Kuropat等[13]的方法，略作修改进行测定。采用整体匀浆法提取牙鲆仔稚鱼的核酸和总蛋白，进一步用紫外分光光度法测定并计算RNA和DNA的含量及浓度，依据Bradford的方法[14]测定总蛋白含量及浓度。 1.3 数据分析 试验数据均用“平均值±标准差”表示，采用SPSS 13.0软件进行统计分析。 2 结果与分析 2.1 DNA、RNA及总蛋白的变化 由图1可知，DNA浓度在22～32日龄期间保持相对稳定，32～34日龄时急剧升高，34～36日龄缓慢升高，在36日龄达到最高值。RNA浓度在24日龄升至峰值（2.34 μg/mg），然后逐渐下降，在32日龄降至最低值（1.15 μg/mg），之后呈先升高再下降的趋势。总蛋白浓度在22～29日龄间