链球菌2型对恩施黑猪致病性的研究-《湖北畜牧兽医》(2017年10期).docx

龙源版权所有 链球菌2型对恩施黑猪致病性的研究作者：谭仕旦来源：《湖北畜牧兽医》2017年第10期 摘要：为研究猪链球菌2型对恩施黑猪的致病性，采用分组试验法，选取同窝8头恩施黑猪，随机分组，试验组（6头）注射猪链球菌2型菌液进行攻毒试验，对照组（2头）正常饲喂，观察记录50 h的试验情况。结果表明，试验组猪全部发病，体温升高、呼吸迫促、败血症和神经症状；剖检病（处）死猪尸体可见不同程度的脑膜充血淤血、关节炎、心肌炎、肺淤血、出血性炎症等病理变化，对照组无异常。证实了猪链球菌2型对恩施黑猪有很强的致病性。 关键词：猪链球菌2型；恩施黑猪；致病性；攻毒试验 中图分类号：S858.28；S855.1+1 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2017）010-0007-02 猪链球菌病（Swine streptococcosis）是由猪链球菌引起猪的一种发病急、死亡率高的细菌性传染病，被列入我国动物传染病中的二类病，人畜共患病，严重地威胁着我国养猪业的发展和人类食品公共卫生安全，引起了人们的高度重视。近年来，依据链球菌荚膜抗原的不同，人们将其分为 35 个血清型（1～34型和1/2 型）[1]。其中猪链球菌 2型（Strptococcus suis type 2， 简称SS2）被认为是猪链球菌 35个血清型中分布最广致病性最强的一个血清型，人感染后可引起化脓性关节炎、脑膜炎、心内膜炎和中毒性休克综合症等[2]。1998年江苏海安县暴发猪链球菌病，25人感染，死亡14人；2005年7月四川省资阳市暴发猪链球菌病，并见有人感染而引起死亡的报道[1]。 近年来，因恩施黑猪的肉质好，养殖效益高，恩施黑猪养殖量日益增加，但在养殖生产过程中，时常发生疑似链球菌混合感染的病例。为了有效防控黑猪链球菌病的发生，特开展本次试验。 1 材料与方法 1.1 菌株 猪链球菌2型菌株[3]来源于长江大学动物科学院实验室分离制备的菌液。 1.2 试剂 TSA、TSB购自上海生工生物工程股份有限公司，按说明书制备培养基；生化鉴定试剂购自杭州天河微生物有限公司；猪链球菌2型高免血清由长江大学动物科学院制备并保存[4]。 1.3 试验动物 试验猪选取90日龄、体重25 kg左右的同窝恩施黑猪，购自恩施咸丰尖山乡某农户。 选择猪群采食量正常，试验前用灭菌拭子采集鼻腔、扁桃体样本检测SS2为阴性，同时对颈静脉采血，用ELISA方法检测其SS2抗体均为阴性。 1.4 菌种的复苏与菌液的制备 室温下解冻菌种，在无菌条件下，用接种环挑取少许菌种，以分区划线法接种在TSA平板上，37 ℃恒温培养24 h。眼观复苏菌种在TSA平板上的菌落大小、边缘整齐度、湿润度、隆起度、表面光滑度、颜色等。挑选单个可疑菌落作标记后，挑取少许按常规方法进行革兰氏染色，观察革兰氏染色后细菌在显微镜下的状态。取镜检后确认的细菌按常规方法接种于TSA平板中，37 ℃恒温培养24 h备用。挑取单菌落接种THB培养基中，37 ℃培养18 h。各菌平板法计数后，调整菌液浓度至1×109 CFU/mL，备用。 1.5 试验猪的感染与临床观察 本试验分A、B两个组，A组为6头恩施黑猪，B组为2头恩施黑猪。试验前将A、B两组分别饲养在独立的栏中，预试期7 d。攻毒试验前测量每头猪的体温。 取“1.4”中制备好的菌液，对A组猪采用颈部肌肉注射，每头注射6 mL，为试验组。B组不注射为对照组。攻毒后，保障充足的饲料和饮水，每天观察猪的临床表现，如饮食情况、体温变化、跛行和神经症状等。每4 h测量全部猪的直肠温度。 1.6 试验猪的病料采集与处理 死后立即解剖、拍照，无菌收集其肝脏、脾脏、心血、脑脊液···试读结束