免疫荧光技术.pdf

免疫荧光检测技术 第一章 绪论 1.1 免疫荧光检测仪研究背景与意义 随着我国经济水平的提升，人民对生活质量要求越来越高。在我们的日常生 活中，存在着各种各样的食物，在提倡绿色食品、健康食品的今天，还是有一些 食品存在严重安全隐患。近年来，食品安全问题在我国频频出现，食品安全危机 成为中国社会的热点问题，2003 年含敌敌畏的金华火腿事件，导致食用者消化系 统的破坏，严重可致死；2004 年阜阳出现的劣质奶粉事件，导致婴儿营养不良和 免疫力低下，严重可致死；2005 年碘超标的雀巢奶粉事件，导致饮用者甲状腺功 能衰退；2006 年出现的含瘦肉精的猪肉事件，导致食用者头晕、恶心和手脚颤抖， 严重可导致心脏骤停致昏迷死亡；2008 年含三聚氰胺的婴幼儿奶粉事件，导致婴 幼儿肾结石，肾衰竭等泌尿系统疾病，严重者可致死；2012 年白酒中塑化剂含量 超标事件，导致饮用者肝功能损坏，严重者可导致肝癌。这些触目惊心的事件让 消费者不禁感慨还有什么食品可以让人安心食用啊，针对目前食品安全的这种现 状，对食品的安全检测必然成为一种趋势。 瘦肉精是一种饲料添加剂，也是一种药物，而不是某种特定的物质。我们把能 促进瘦肉生长，抑制肥肉生长的添加剂叫做瘦肉精，例如克伦特罗和莱克多巴胺 等物质。克伦特罗这类药物主要为肾上腺类的物质，是一种人造的兴奋剂，该兴 奋剂对支气管哮喘的治疗有一定的帮助，但是它的副作用更加大，因此被禁用。 如果用五到十倍的治疗剂量用在动物的喂养上，就可促使家畜瘦肉的生长，同时 促进家畜脂肪的分解，就这样瘦肉精被非法商贩利用。瘦肉精对人体的健康有很 大的危害，心脏对克伦特罗这类物质能产生兴奋反应，支气管平滑肌在这类物质 的刺激下有很强的扩张作用，更严重的情况，能够诱发恶性肿瘤。对于患有冠心 病或甲状腺功能亢奋者，在食用含有瘦肉精的肉食品后，会产生更大的危害，如 果长期食用含克伦特罗这类物质的肉食品，最恶劣者会产生染色体的畸变。针对 出现的这些食品安全问题，本论文提出了利用激光诱导荧光技术和免疫荧光技术 来检测瘦肉精，以达到快速和准确定量测量的目的，设计的检测仪重量轻、体积 小，便于携带，在电池供电情况下能在户外使用。 设计的免疫荧光检测仪能够准确定量检测出克伦特罗的含量，不仅仅是技术上 的提升，而且带来的经济效益和人民生活品质的提升尤为重要。该检测仪可以初 步适用于食品安全领域和医疗检测领域，并且为实验室和现场的免疫荧光检测提 1 供了高效的工具与手段。免疫荧光检测仪器不仅能产生一定的经济效益，而且还 保障了人们身体健康的安全，这是本论文的意义所在。 1.2 瘦肉精检测技术的研究现状与发展趋势 目前，国内外检测瘦肉精的方法主要有四种，即高效液相色谱法、气相色谱- 质谱法、胶体金免疫层析法和酶联免疫法。 1) 高效液相色谱法，是检测克伦特罗这类物质的半确证性方法。使用高效液相色 谱时，液体待检测物在不同的时间被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由 于被测物中不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质按顺序离开色谱柱， 通过高灵敏度检测器得到不同的峰信号，每个峰顶都代表一种化合物的种类，最 后通过分析比对这些信号来判断待测物中所含有的物质。该检测方法的优点是检 测精确度高，假阳性率低，专属性好，选择性强，最低检测限可达0.05μg/ kg ；缺 点是检测过程烦琐，检测耗时久，操作过程较复杂，同时需要贵重仪器来辅助， [1] 在价格上也较昂贵，在实际应用中推广比较难 。 2) 气相色谱-质谱法，是检测克伦特罗这类物质的确证性方法。气相色谱是以惰 性气体作为流动向，以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相，当多组分 的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间 后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同，吸附力弱的组分容易被解吸下来， 最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力最强的组分最不容易被解吸下来，因此最 后离开色谱柱，因此各组分得以在色谱柱中彼此分离，顺序进入检测器中被检测 并记录下来。该检测方法的优点是检测灵敏度更高，假阳性率更低，在含有多类 残留物质的情况下，还能够对某种想要分析的残留物进行定性和定量测量；缺点 是检测过程同样烦琐，检测耗时同样久，操作过程同样的复杂，需要贵重仪器辅