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第八章 微生物的遗传变异和育种; 表型改变
不涉及遗传物质结构或复制过程的改变,常发生在转录水平或翻译水平上,故遗传型相同的个体在不同环境条件下,常表现出不同的形状。
遗传变异规律研究意义
①促进分子生物学基本理论问题研究;②为邻近学科发展提供方法论;③为育种工作提供理论基础。
微生物是遗传学研究的最好材料和对象
①微生物结构简单;②营养体一般都是单倍;③微生物繁殖速度快;④易积累不同的中间及最终代谢产物;⑤环境条件对微生物作用直???均匀;⑥存在多种方式的繁殖类型;⑦微生物的变异易被识别;⑧参与基因工程的载体、供体、受体三角色。;内容提要;一、遗传变异的物质基础;活的S菌;SⅢ〖杀死〗 ;;DNA只含P不含S,Pr只含S不含P;
用含同位素S35, P32的培养基培养大肠杆菌;
让T2感染上述大肠杆菌使其打上S35 、 P32标记。; 植物病毒蛋白质和RNA可以人为地分开,
同时又可把它们重新组合成具感染性的病毒.;; 2.遗传物质在细胞中的存在方式
(1)细胞水平:细胞核(数目不同)、核质体,细胞质遗传物质。
(2)细胞核水平:染色体、核酸(数目);
(3)染色体水平:核小体、RNA;
(4)核酸水平:DNA、RNA;
(5)基因水平:具有特定核苷酸序列,能自我复制的遗传功能单位;结构基因、调节基因。
(6)密码子水平:遗传的信息单位,核苷酸的排列顺序,三联密码;64种。
(7)核苷酸水平:最低突变单位或交换单位;A、G、T、C。;;大肠杆菌基因组;酵母菌基因组;;二、基因突变和诱变育种; 条件致死突变型(株);形态突变型 ; (2)基因突变规律
①不对应性
②稀有性:突变率较低;
突变率:一个细胞在每一世代中发生突变的机率,或单位群体繁殖一代过程中所形成突变体的个数;
③独立性:各性状均可发生突变;
④诱变性:外界因素可显著提高突变率。
⑤稳定性:突变性状是稳定遗传的;
⑥可逆性:突变性状可回复突变;
⑦自发性:突变是自发进行的。;;;;转换、颠换 ;间接引起置换的诱变剂;G; 由于诱变剂引起DNA分子中缺失或增加少数几个碱基对,造成突变点以后全部遗传密码转录与转释发生错误。;染色体畸变 ; ②自发突变机制
自发突变:某些微生物在没有人工参与下所发生的突变。
机制:背景辐射和环境因素诱导;互变异构效应;环出效应。
2.突变和育种
(1)自发突变与育种
①从生产中选育;
②定向培育优良品种:特定环境长期处理微生物,移种传代,累积、选择合适的自发突变体。
Camette和Guerin,13年,传230代,1923年获得卡介苗。
梯度培养皿的应用。; (2)诱变育种
利用理化因素处理微生物细胞群体,促使突变频率大幅度提高,然后选出少数优良性状的菌株,供科研及生产使用。
特点:提高菌株的生产能力;改进产品质量;扩大品种、简化生产工艺;速度快、方法简便、收效显著。;;要求:有力性状的菌株;积累前体或最终产物代谢。
种类:生产中用过的自发变异菌株;野生型菌株;
诱变过的菌株。;;合适剂量的确定
剂量以诱变剂浓度和处理时间来表示;实际工作中常用杀菌率作为相对剂量。
合适剂量:能扩大变异幅度又能促使变异移向正变范围的剂量。
诱变处理的方法
复合处理的协同效应
两种或多种诱变剂先后使用;两种或多种诱变剂同时使用;同种诱变剂重复使用。
④变异菌株的分离和筛选
菌悬液的后培养:突变必须复制才能表现出来;提高突变率。
寻找和利用形态、生理和产量间的相关性。;;设计或采用高效筛选方案或方法;;;;;;; 微量蛋白质的完全培养基上
小菌落是营养缺陷型突变株;; 营养缺陷型的鉴定:制备缺陷型平板;缺陷型类别鉴定;种类确定;
营养缺陷型的表示方法:lys-/lys+;L-/L+;lys/LYS。
(3)菌种的退化与复壮
遗传性的变异是绝对的、稳定性是相对的;
菌种退化:是群体中一个从量变到质变的逐步演变过程。
种类:形态上退化;生理上退化,特别是产量的下降。
退化的原因:相关基因负突变;环境条件,培养条件、保藏条件等。
防止措施:菌种保藏方法;传代次数;单细胞分离纯化等。
菌种复壮
狭
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