人类染色体作图.ppt

* * 1、克隆基因定位法（p91） 采用已克隆基因的cDNA探针与保留在杂种细胞内的人染色体DNA酶切序列进行分子杂交，来确定克隆基因所在的染色体。 (三）DNA介导的基因定位（核酸探针方法） 第三十张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 以人体白蛋白基因cDNA为探针的克隆基因定位法 电泳条带大小 人细胞 CHO 中国仓鼠 人CHO杂种细胞 含4号染色体的杂种细胞 不含4号染色体的杂种细胞 阳性细胞 阴性细胞 3.5Kb √ √ √ √ √ 6.8Kb √ √ √ 因此，将此基因定位于4号染色体上 第三十一张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 2、原位杂交法 以标记的探针（同位素、生物素或荧光染料）直接同中期染色体进行原位杂交。 第三十二张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 把来自人类β珠蛋白基因的克隆DNA制备探针，与含有人体不同染色体组合的体细胞杂种杂交，发现只有携带人体第11号染色体的细胞株系才能与之杂交，于是就把这个基因定位于11号染色体上。 第三十三张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 二、人类染色体作图 ?? 通过遗传重组所得到的基因在具体染色体上的线性排列图称为遗传连锁图。? ? 遗传图谱 第三十四张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 物理图谱 这是一种高分辨率的染色体作图，是确定遗传标志或界标在染色体上所处的位置，以物理距离为图距单位，如 bp，kp等。物理图阐明了基因之间的精确距离。 第三十五张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 遗传标记： 指可以明确反映遗传多态性的生物特征。 在经典遗传学中，遗传多态性是指等位基因的变异。 在现代遗传学中，遗传多态性是指基因组中任何座位上的相对差异。 第三十六张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 遗传标记的类型 形态学标记（morphological marker） 细胞学标记(cytological marker) 生化标记(biochemical marker) DNA分子标记(molecular marker) 第三十七张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 形态学标记 形态标记即个体的外部形态特征。 简单直观、经济方便； 但其数量有限、多态性较差 表现易受环境影响，并且有一些标记与不良性 状连锁。 形态标记的获得需要通过诱变、分离纯合的过程，周期较长。 主要在早期使用。 第三十八张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 细胞学标记 细胞学标记即细胞染色体的变异。 包括染色体核型（染色体数目、结构、随体有无、着丝粒位置等）和带型（C带、N带、G带等）的变化。 与形态标记相比，优点是能进行一些重要基因的染色体或染色体区域定位。 但细胞学标记材料需要花费较大的人力和较长时间来培育，难度很大；同时某些物种对染色体变异反应敏感；还有些变异难以用细胞学方法进行检测。 第三十九张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 生化标记 生化标记包括同工酶和等位酶标记。分析方法是电泳和组织化学染色法,将酶的多种形式转变成肉眼可辩的酶谱带型。 优点：一是表现近中性，对生物经济性状一般没有大的不良影响；二是直接反映了基因产物差异，受环境影响较小。 缺点：一是可用标记数量少，二是染色方法和电泳技术有一定难度。 第四十张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * DNA分子标记是指在DNA分子水平上，通过一定方式或特殊手段来反映生物个体之间或种群之间具有差异性状的DNA片段。它直接反映基因组DNA间的差异。 分子标记 第四十一张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 分子标记的优越性表现为： 直接以DNA的形式表现，在生物体的各个组织、各个发育阶段均可检测到，不受季节、环境限制，不存在表达与否等问题； 数量极多，遍布整个基因组，可检测座位几乎无限； 多态性高，自然界存在许多等位变异，无须人为创造； 表现为中性，不影响目标性状的表达； 许多标记表现为共显性的特点，能区别纯合体和杂合体。 第四十二张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 第一代分子标记，以Southern杂交技术为核心的分子标记，（如RFLP、VNTR）。 第二代分子标记，以PCR技术为核心的分子标记，（如RAPD、AFLP、SSR）； 第三代分子标记，单核苷酸多态性（SNP）标记。它也是以PCR技术为基础的分子标记技术。 分子标记的三个阶段 第四十三张，课件共七十一张，编辑于2022年5月 * * 第一代分子标记（基于Southern杂交技术的分子标记