培养基和实验基本操作技术PPT.ppt

第三章 培养基和实验基本操作技术;一、培养基中的主要成分及其作用;1、常用的N源物质;（1）蛋白胨;（2）、牛肉浸液;2、糖、醇类物质;（二）、水;（三）、凝固剂;（四）、抑制剂;（五）、指示剂;二、培养基的类型;（一）、根据培养基的物理状态来区分;1、液体培养基 ;2、固体培养基 ;3、半固体培养基 ;（二）、根据培养基的用途来区分 ;1、增殖培养基 ;增菌、运送用培养基;2、选择培养基 ;分离培养用的培养基;3、鉴别培养基 ;鉴别用培养基;（三）培养基制备的基本方法和注意事项 ;1、培养基的制备记录;2、培养基成分的称取;3、培养基各成份的混合和溶化;4、培养基pH的校正;5、培养基的过滤澄清;６、培养基的分装;7、培养基的灭菌;8、培养基的质量测试;9、培养基的保存 ;思考题;培养基配制 – 器材;培養基配製 – 儀器;培养基的配制 – 装水;培養基配製 – 秤藥;培養基配製 – 溶解培養基;注意事項 – 配藥結束;培養基配製 – 分裝;放入杀菌锅 (Autoclave) 灭菌;加水蓋過鐵板;注意事項 – 殺菌釜使用;注意事項 – 殺菌釜使用;培養基配製 – 平板培養基;第二节、微生物检验的基本操作技术;主要内容;一、无菌技术;（一）什么是无菌技术;（二）无菌环境;1、无菌室;2、超净工作台; （三）无菌器材;（四）无菌操作;2、进入无菌室前的准备;3、检验操作过程的无菌操作要求;无菌操作;1. 接種環前端鐵絲部分以酒精燈烧红来菌，後端鐵棒部分過火;2. 試管前端過火;4. 試管傾斜，放入接種環;5. 試管前端過火，蓋上試管蓋;5. 試管前端過火，蓋上試管蓋;2. 自 Plate 上取單一菌落 (方法一：蓋子微開遮住培養基，避免空氣中菌體掉入);1. 擠出安全吸球內空氣，插上滅過菌之玻璃吸管;1. 調整 Pipetman 刻度 (P1000 吸取範圍 200 ~ 1000μl);3. 按鈕壓至第一段 (不可壓至最底);5. 慢慢釋放按鈕，即可 吸取液體;1. 試管前端過火;方法一：以接種環沾菌，放入新的培養基中接菌;操作時離火源遙遠;無菌操作 – 錯誤示範;無菌操作 – 錯誤示範;注意事項 – 生物性廢棄物;二、微生物的接种与分离技术;（一）、接种;１、接种工具和方法;常用的接种方法有以下几种： ;５）涂布接种 ６）液体接种 ７）注射接种 ８）活体接种 ;(二)、分离纯化;１、倾注平板法;２、涂布平板法;;３、平板划线法; 平板划线法： 1、倒平板，标记培养基名称，编号和实验日期。 2、划线方法 　　稀释混合平板法 ： 1、先加菌 2、倒平板时注意培养基温度 3、混合均匀 ;三、微生物的培养方法;（一）、一般培养法（需氧培养）;（二）、厌氧培养方法;A、厌氧缸法;B、厌氧罐法;;C、厌氧手套箱;（三）、二氧化碳培养法;二氧化碳培养箱;二氧化碳培养法;四、微生物培养特性观察与记录;1.点状 2.圆形 3.丝状 4.不规则形 5.假根状 6.纺锤状 7.扁平 8.隆起 9.凸起 10.垫状 11.脐状 12.边缘整齐 13.波状 14.裂片状 15.啮蚀状 16.丝状 17.卷发状 18.丝线状 19.刺毛状 20.串珠状 21.疏展状 22.树根状 23.假根状 24.丝状 25.串珠状 26.乳头状 27.绒毛状 28.树根状 29.量杯状 30.萝卜状 31.漏斗状 32.囊状 33.层状 34.絮状 35.环状 36.蹼状 37.膜状 ;;思考题 1、什么是无菌技术？ 2、如何做好无菌室的消毒和防污染工作？ 3、如何做好超净台的使用与保养？ 4、无菌操作的目的是什么？ 5、进入无菌室前要做好哪些准备工作？ 6、验操作过程的无菌操作要求包括哪些内容？;加油呀!!!!!