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杂种体细胞分裂、形成愈伤组织分化芽第64页,共89页,2024年2月25日,星期天四、再生植株的鉴定原生质体融合后的杂种细胞以后生长情况:1、2个细胞的细胞质和细胞核,保持完整、不丢失,同步分裂。对称体细胞杂交(完全融合)2、一个细胞的细胞质和核完全丢失,变为普通细胞3、一个细胞质完全丢失,另外一个细胞核完全丢失,质-核杂种细胞。不对称杂交4、一个或者两个细胞的细胞质和染色体不同程度丢失,质-核杂种细胞(常常其中1个细胞的绝大部分染色体丢失,部分基因整合到另外一个细胞的基因组中)。不对称杂交。第65页,共89页,2024年2月25日,星期天体细胞杂种再生植株的鉴定:1.形态观测:2.?细胞学分析:3.分子鉴定:4.同功酶鉴定第66页,共89页,2024年2月25日,星期天再生植株的形态比较红白菜杂种植株榨菜第67页,共89页,2024年2月25日,星期天拟南芥与油菜原生质体融合再生植株叶片形态拟南芥油菜杂种第68页,共89页,2024年2月25日,星期天薄荷原生质体融合再生植株叶片比较第69页,共89页,2024年2月25日,星期天拟南芥萝卜杂种拟南芥和萝卜原生质体融合再生植株比较形态比较第70页,共89页,2024年2月25日,星期天拟南芥萝卜DNA差异第71页,共89页,2024年2月25日,星期天叶绿体基因trnL/TrnF线粒体基因orf138线粒体基因orfB萝卜萝卜萝卜拟南芥DNA差异第72页,共89页,2024年2月25日,星期天玉米-小麦原生质体融合再生植株玉米小麦原生质体融合第73页,共89页,2024年2月25日,星期天玉米-小麦原生质体融合再生植株第74页,共89页,2024年2月25日,星期天玉米-小麦原生质体融合再生植株的染色体分析第75页,共89页,2024年2月25日,星期天分子方法(RAPD)鉴定小米-玉米杂种M=玉米W=小麦第76页,共89页,2024年2月25日,星期天植物体细胞杂交的前景与存在的问题克服了物种之间的生殖隔离,可以实现遗传物质跨种、属、科、目、纲、门、界传递,为培育新品种、甚至新物种提供了手段,前景诱人。存在的问题:1、再生困难:不同原生质体容易融合,但体细胞杂种难分裂、分化和再生,更难得到同时表现2个植物性状的个体。1978年土豆-番茄(1978年)象番茄,但有土豆的一些特征。2、遗传物质丢失:不同原生质体之间存在严重排斥3、植株稳定性差第77页,共89页,2024年2月25日,星期天第78页,共89页,2024年2月25日,星期天第79页,共89页,2024年2月25日,星期天从事小麦与近缘及远缘野生种高频率的体细胞杂交技术研究20年,创立了小麦体细胞杂交转移异源染色体小片段的新技术。在此基础上,系统研究了体细胞杂种后代的核/质基因组、异源染色体小片段和DNA片段的遗传规律及与发育和新性状产生的关系。培育了多个耐盐、耐旱体细胞杂种新品种,其中“山融3号”在盐碱地和旱肥地的大面积种植的平均亩产465斤,为盐碱地和旱肥地的利用奠定了基础,该品种被定为2006年山东省良种主导品种。夏光敏,山东大学生命科学学院教授,博士生导师第80页,共89页,2024年2月25日,星期天第81页,共89页,2024年2月25日,星期天第82页,共89页,2024年2月25日,星期天新铁炮百合东方百合第83页,共89页,2024年2月25日,星期天第84页,共89页,2024年2月25日,星期天亲本植株的花杂种植株的花OrientalHybridLilyAcapulcoLiliumformolongiHakuchoShirotaeA+CB+C品种第85页,共89页,2024年2月25日,星期天杂种繁殖、栽培后,性状稳定东方百合Acapulco第86页,共89页,2024年2月25日,星期天第87页,共89页,2024年2月25日,星期天流式细胞仪测定细胞内DNA含量第88页,共89页,2024年2月25日,星期天感谢大家观看第89页,共89页,2024年2月25日,星期天杨树原生质体培养植株再生LiquidMS+5?M2,4-D;MS+10?MKTor1?MTDZ.第32页,共89页,2024年2月25日,星期天杨树原生质体培养植株再生1/2MS第33页,共89页,2024年2月25日,星期天将
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