实验四辣椒红色素的提取与分离.docx

实验四：辣椒红色素的提取与分离

专业：生物工程班级：

学号：

姓名：指导教师：设计时间：

实验申请

实验项目：辣椒红色素的提取与分离

实验原料：干辣椒若干

实验仪器：水浴锅（80℃），干粉搅拌器，索式提取器，旋转

蒸发仪，层析柱

试剂：丙酮（石油醚95%乙醇）硅胶环己烷70%乙醇等

耗材及辅助器材：滤纸脱脂棉试管若干圆底烧瓶一个玻璃

棒1支漏斗等。

参考文献：

谭天伟.生物分离技术.北京：化学工业出版社.，2007.7

蒋本国，王艳颖，李春斌，刘秋.生物化学实验.大连民族学院。2010.7

刘宝全.生化分离工程实验讲义（内部试用版）.大连民族学院生命科学院.2011.6

刘国诠，生物工程下游技术，北京：化学工业出版社，2003。

陈来同，生物化学产品制备技术，北京：科学技术文献出版社，2004。

qtw-1

实验记录

操作步骤： 操作说明及结果记录：

取红辣椒干粉10g

↓

用95%乙醇300mL，80℃索式提取4h

（或用其他溶剂如环已烷提取）

↓

浸提液减压蒸馏（40℃)

↓

浓缩液用少量环己烷溶解待用

↓

取8mL硅胶和20ml环己烷混匀装柱

↓

将浓缩液上样

↙↓

洗脱液1环己烷

↙ ↓

洗脱液2环己烷/丙酮(10:1)

分部1 分部2色素

↓

纸层析点样,跑样

紫外光下观测

qtw-2

回流次数12

回流次数

1

2

3

4

5

时间

9:18

9:39

9:55

10:13

10:28

颜色

深橘红色

深橘红色

桔黄色

桔黄色

淡黄色

实验结果：

1、取红辣椒干粉质量m=5.446g

索氏提取数据记录表

（注：开始加热时间为8:05，结束时间为：10:28，历时2小时23分，水浴温度：99℃）

2、索氏提取浸提液的理化特征：(1)第一、第二次回流液为深橘红色

3

第三、第四次回流液为深桔黄色

第五次回流浸提液为浅黄色

4

第五次回流后，粗体液呈深橘红色，清澈透明，颜色鲜艳，似干红颜色。

3、总的浸提液经旋转蒸发提纯后，梨形瓶内壁上附有一层粘稠的油状液体体，光亮

透明。闻上去有清香的辣椒味道。

5

产品

（注：开始旋转蒸发的时间为：10:56,结束时间为：11:10，历时14分钟）

4、称重：

空瓶质量：209.16g

空瓶加产物质量：210.26g

最终产物质量=210.26g—209.16g=1.1g

最终产物质量

1.1

产品的率? ?100%? ?100%?20.20%

原料样品质量

5.446

5、样品的柱层析

柱层析所用样品的体积：0.3ml

样品经层析柱分离后产生三个色带，从上到下分别是：橙黄色 深红色 黄色，

其中黄色色带最长然后是橙黄色，最后为深红色。

6

辣椒红素

辣椒玉红素

玉米黄质

7

实验分析

1.提取结果分析

⑴辣椒红色素的粗提取：

辣椒红色素是天然红色素的一种，可从成熟的茄科红辣尖椒(Capsicumannum1)中提取。辣椒果皮含有0．2％～0．5％的胡萝卜色烯类色素，其中辣椒红素和辣椒玉红素占总量的50％～60％。其易溶于极性较大的有机溶剂，几乎不溶于水。本实验中采用无水乙醇作为提取溶剂，采用索氏提取法常压回流提取。粗体产物为透明酒红色液体。

⑵硅胶柱层析：（使用硅胶柱层析结果）

样品经层析柱分离后产生三个色带，从上到下分别为：橙黄色、深红色、黄色。根据文献记载分析：

①最上层橙黄色色带中主要应为辣椒红素

辣椒红素是一种辣椒中的提取物，属于类胡萝卜素的一种。其分子式为：

辣椒红素是一种辣椒中的提取物，属于类胡萝卜素的一种。其分子式为：

②中间深红色的条带为辣椒玉红素

②中间深红色的条带为辣椒玉红素

分子式为：

8

③最下层黄色条带为玉米黄质：

分子量：

分子量：568.87 脂溶性粉末或油状物，为 β胡萝卜素的衍生物，溶于乙醚、

石油醚、丙酮、酯类等有机溶剂，不溶于水， 在体内不能转化为 Va，没有Va

活性，对光、热稳定性差，尤其光照对玉米黄质影响最大；对 Fe3+和Al3+的稳

定性也较差，但对其它离子、酸、碱及还原剂

Na2SO3等较稳定。

分子式为：

⑶产品得率分析

本实验产品的得率为20.20%，得率偏低，除操作误差外，主要有以下原因：

①回流时间偏短，最终回流液体仍有淡黄色。

②提取不充分，进一步纯化时更换容器，有部分损失。

2、注意事项：

水浴温度应该保持在80摄氏度左右。

进行索氏提取前，应将提取物用纸包好不能够有散漏。

丙酮用完后必须立刻密闭防止丙酮挥发。

在索氏提取器内加入的丙酮不能超过容量的一半。

旋转蒸发仪使用时应提前打开抽气泵。

浓缩液收集瓶必须保证干净。

在减