MSC干细胞培训课.ppt

间充质干细胞基础知识 间充质干细胞间充质干细胞〔Mesenchymal stem cell, MSCs〕是干细胞的一种类型，具备干细胞的基本特征，即很强的自我增殖、多向分化和归巢潜能。MSC起源于中胚层，可以分化为中胚层的间质组织 。 在进行骨髓的体外培养时，发现有些贴壁的纺锤形细胞在培养过程中能够分化形成类似骨或软骨的集落。将这些细胞移植到实验动物体内，能形成骨、软骨。MSC的研究历史 MSC的生物学特征贴壁生长特定外表标志 阳性 〔≧95%+〕 阴性 〔≦2%+〕 CD105 CD45 CD73 CD34 CD90 CD14 or CD11b CD79 or CD19 HLA-DR多向分化潜能 体外分化能力: 软骨，成骨，脂肪The International Society For Cell Therapy position statement Cytotherapy, 8:315-317, 2006 UCMSC的优势来源丰富、采集简便，对供者无不良影响数量丰富，增殖能力强，可屡次使用基因稳定、不易突变、使用安全可靠免疫原性低，具有免疫调节功能，使用时不引起免疫排斥反响，还可抑制该反响具有很强的促进造血恢复功能，广泛的临床应用范围，可治疗多种疾病 MSC的生理作用MSC在骨髓中所扮演的主要角色是和造血干细胞产生交互作用，提供造血干细胞生长所需的基质及生长因子。MSC调节机体免疫功能，分泌多种细胞因子。MSC可分化为多种间质组织，如软骨，骨，肌肉，上皮等。 MSC的支持造血调节免疫效应MSC可分泌多种细胞因子，提供造血细胞生长微环境，支持造血功能重建。MSC可抑制T细胞、B细胞增殖活化，抑制DC细胞成熟。在临床实验中可加快造血功能恢复，减轻移植后GVHD反响。动物实验中可延长小鼠移植皮片的存活时间。 MSC促进皮肤移植成功 MSC的多向分化能力 骨髓骨骼肌脐血骨膜胎肺胎肝胎盘脂肪羊水真皮胰腺间充质干细胞脐带MSC在人体的分布 脐带间充质干细胞多潜能性、增殖能力强天然生物资源低抗原性，无免疫排斥，调节免疫MSC产率高,1MSC/1600MNC细胞纯净，病毒污染风险低易产业化和临床应用成人骨髓间充质干细胞多潜能性、增殖能力有限研究最早、了解最深自体来源、无免疫排斥MSC产率低,1-10MSC/106MNC有病毒感染风险有限临床应用不同来源MSC的比较 脐带间充质干细胞〔UC-MSC〕 体外培养扩增获取人UCMSC原代贴壁原代培养传代扩增对于原代细胞中混杂的其它异质细胞，利用MSC的贴壁和高增殖潜能，通过连续传代，筛除那些不能贴壁生长和虽能贴壁生长但增殖能力差的细胞，最后通过流式细胞术鉴定。 UCMSC的免疫表型A： CD31 、 CD34、CD45和HLA-DR阴性<2%B： CD90 、 CD73 、 CD105 、 CD29和CD44阳性>95%AB UC-MSC与BM-MSC〔形态学〕UC-MSCBM-MSCDay 7Day 7Day 14Day 14〔100X〕形态相似梭形细胞平行排列或漩涡状生长 UC-MSC与BM-MSC 〔倍增时间〕UC-MSCsBM-MSCs*p<0.05 UC-MSC的倍增时间明显短于BM-MSC Qiao et al. Cell Biology International 2008, 32:8-15UCMSC染色体核型 UC-MSC与BM-MSC〔免疫表型〕Biology of Blood and Marrow Transplantation 13:1477-1486,2007Haematologica. 91:1017-26, 2006 UC-MSC和BM-MSC〔细胞因子〕CytokineUC-MSCBM-MSCIL-6+++LIF++IL-3--GM-CSF++-G-CSF+-SDF-1+++M-CSF++VEGF++++FLt-3++SCF++++β2MG++++Biology of Blood and Marrow Transplantation 13:1477-1486, 2007Haematologica. 2006 ;91:1017-26 UC-MSC与BM-MSC 〔多向分化〕脂肪成骨UCUCUCBMBMBMDifferentiation induction -