细菌耐药性检测-2-杨飞翔2023.pptxVIP

第四章 细菌耐药性检测-2;本 章 内 容;一、临床常见抗菌药物有哪些？ 各类典型的有哪些？作用机制是什么？;细菌的增殖 DNA复制、转录、翻译及蛋白质合成;二、抗菌药物敏感试验(AST)目的是什么？ 有哪一些方法？ KB法试验原理和步骤？ 怎么去量取KB法抑菌圈直径？质量控制？;KB法抑菌圈判读总体原则：;KB法抑菌圈结果判定小结 1、按抑菌环直径大小参照NCCLS标准报告敏感、中介、耐药、SDD或NS。 2、判断结果时应注意以下几点： （1）黑色背景下，采用反射光量取完全抑制区直径； （2）葡萄球菌/肠球菌在苯唑西林、万古霉素、利奈唑胺时，采用透射光，量取完全抑制区； （3）磺胺和复方磺胺、多粘菌素扩散慢，抑菌环内往往有少量细菌生长（20%生长），应忽略不计，测量外圈为准； （4）迁徙生长细菌，可向抑菌圈内蔓延生长，但抑菌圈的边缘仍清晰可辨，其蔓延生长的稀薄菌种应忽略不计，测量外圈； （5）忽略色素圈和溶血圈，量取完全抑制区。 ;三、顺产7天新生儿发生发烧、哭闹、纳差、精神状态极差、偶抽搐，各项炎症指标均超正常范围2-3倍以上？脑脊液培养临床微生物报告革兰阳性球菌呈链状，考虑什么菌感染？;微生物报告无乳链球菌（B群链球菌），药敏结果显示青霉素、环丙沙星、氯霉素敏感，怎么使用抗菌药物？ 青霉素？头孢曲松？头孢呋辛？亚胺培南？ 左氧氟沙星？氯霉素？; 头孢呋辛、拉氧头孢、美罗培南、氯霉素、头孢曲松、头孢吡肟、头孢唑肟均能进入脑脊液中，可用于脑膜炎治疗。其余药物不能透过血脑屏障，治疗无效。 青霉素？头孢曲松？头孢呋辛？亚胺培南？ ;学习目标;细菌耐药性分类 ;;;一、细菌耐药性与耐药机制 1. 产生一种或多种水解酶、钝化酶和修饰酶； 2. 抗菌药物作用靶位改变，包括青霉素结合蛋白 位点、DNA解旋酶、DNA拓扑异构酶Ⅳ的改变等； 3. 细菌膜通透性改变，抗菌药物渗透障碍，包括细菌生物被膜形成和通道蛋白丢失； 4. 细菌主动外排系统亢进。 上述四种耐药机制中，第一、二种耐药机制具有专一性，第三、四种耐药机制不具有专一性。 ;;;;;;;HIV;;一、MRSA;MRSA耐药机制;MRS（甲氧西林耐药葡萄球菌）检测方法;MRSA显色平板;PBP2a快速凝集试验; 耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA) 和 耐甲氧西林的葡萄球菌 (methicillin-resistant staphylococci, MRS) 多由mecA基因介导，其基因产物是低亲和力的PBP2a。目前，采用苯唑西林和头孢西丁的药敏结果检测MRSA和MRS。 菌株一旦检测为MRS，则对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类和含酶抑制剂的复合制剂均应报告耐药（除外抗MRSA的头孢菌素），临床治疗可能无效。;二、葡萄球菌青霉素耐药 / β-内酰胺酶检测;二、葡萄球菌青霉素耐药和β-内酰胺酶;二、葡萄球菌青霉素耐药和β-内酰胺酶;二、葡萄球菌青霉素耐药和β-内酰胺酶检测 ;2. 葡萄球菌诱导β-内酰胺酶检测 范围：如果青霉素的药敏结果出现以下情况，需要做诱导β-内酰胺酶的检测 。青霉素（Pen）MIC ≤0.12 μg/ml or Zone diameter ≥29 mm。 方法：将细菌传代至BA或MH 平板上，用OX或FOX作为诱导剂，过夜培养，检测抑菌圈周围细菌 B-内酰胺酶产酶情况。;二、金葡菌青霉素抑菌圈-边缘试验; 三、VISA和VRSA; 三、VISA和VRSA检测方法; 三、VISA和VRSA结果解释;四、克林霉素诱导耐药试验;四、需检测诱导性克林霉素耐药菌株;诱导性克林霉素耐药（erm介导）;葡萄球菌诱导性克林霉素耐药的MIC检测方法; ; 五、耐万古霉素肠球菌VRE; 五、耐万古霉素肠球菌VRE; 五、VRE检测方法; 五、VRE检测方法; 五、VRE分子检测及分型; 五、VRE检测注意事项及解释; 六、氨基糖苷类高水平耐药肠球菌 （high level aminoglycoside-resistant Enterococci,HLARE）;六、HLAR结果解释;七、青霉素耐药肺炎链球菌 PRSP;七、青霉素耐药肺炎链球菌 PRSP;能被酶抑制剂所抑制：舒巴坦/克拉维酸; 八、ESBL; 八、ESBL检测方法;MH平板均匀涂布，平板中心贴AMC，距离纸片中心分布贴CRO/ATM/CAZ/CTX，35℃培养18-20h，出现坑或钥匙扣现象，疑是ESBL。; 八、ESBL检测初筛试验; 八、ESBL检测确证试验（KB法）;头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸两组药任何一个药，加与不加CA后MIC相比降低