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生物样本样品前处理演示文稿 当前第1页\共有14页\编于星期四\19点 优选生物样本样品前处理 当前第2页\共有14页\编于星期四\19点 简介 当前第3页\共有14页\编于星期四\19点 前处理技术 1、直接稀释法：简单、回收率高、成本低，但选择性差，应用有限 2、超滤法：多用于测定游离药物浓度 3、蛋白沉淀法：几乎适用于所有小分子化合物，简单快速，回收率高，但选择性差，基质效应严重 4、液液提取法：基质效应降低，低成本，重复性好；但难以自动化，不适用于水溶性化合物的提取，极性相差较大的化合物同时提取困难 5、固相萃取法：可实现自动化，基质效应降低，同时完成样品的富集与净化；但成本较高 当前第4页\共有14页\编于星期四\19点 液液提取法 利用目标化合物在生物基质和与水不互溶的有机溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从生物基质中转移至有机相中。 两相的分离需借助两相的密度差来实现 原理：相似相溶 分配系数：kA=yA/xA yA和xA分别表示在萃取相和萃余相中的质量比率 选择性系数（分离系数）：β=kA/kB= 萃取剂的选择： 1、选择性好：表现为选择性系数大。2、萃取容量大：表现为分配系数大。3、萃取剂与原溶剂的互溶度。4、萃取剂和原溶剂有较大的密度差。5、化学稳定性耐酸耐碱、抗氧化还原、耐热、无腐蚀。6、安全性好。7、经济性好。 Tips: PH和温度对萃取有一定影响。 当前第5页\共有14页\编于星期四\19点 常用液液提取溶剂 溶剂名称 分子量 沸点（℃） 密度（g/mL) 偶极矩（D) 二氯甲烷 84.9 40 1.33 1.60 乙酸乙酯 88.1 77.1 0.90 1.78 氯代正丁烷 92.6 77 0.89 乙醚 74.1 34.5 0.71 1.15 戊烷 72.2 36.1 0.63 0 环己烷 84.2 80.7 0.78 0 正己烷 86.2 69 0.66 0.08 甲苯 92.2 110.6 0.87 0.36 异丙醇* 60.1 82.4 0.79 1.66 四氢呋喃* 72.1 66 0.89 1.63 乙腈* 41.1 81.6 0.78 3.92 正丁醇* 74.1 117 1.00 1.50 水* 18.0 100 1.00 1.84 注：“*”表示与水互溶 偶极矩越小，极性越小 当前第6页\共有14页\编于星期四\19点 固相提取法 ◇HLB(Hydrophilic-Lipophilic Balance Copolymer)材料的优点 △水可浸润 △反相保留 △PH1-14范围内稳定 △没有裸露硅羟基 当前第7页\共有14页\编于星期四\19点 固相提取法 当前第8页\共有14页\编于星期四\19点 固相提取法 当前第9页\共有14页\编于星期四\19点 固相提取法 改变化合物PH，酸性 保留，碱性洗脱 当前第10页\共有14页\编于星期四\19点