第十章 革兰氏阴性需氧杆菌.pptVIP

* * 第十章 革兰氏阴性需养杆菌 [内容提要] * 第一节 布氏杆菌属 第二节 假单胞菌属 第三节 波氏菌属 第四节 军团菌属 第五节 弗朗西斯菌属 第六节 摩拉菌属 第七节 不动杆菌属 第一节 布氏杆菌属 (Brucella) 一、形态及染色特性 * 呈球杆形或短杆形，单在，革兰氏阴性菌 * 柯兹罗夫斯基或改良Z-N、改良K氏染色—红色 布鲁氏菌染色照片 * 染料（沙黄、孔雀绿）—迟染的特性 布鲁氏菌电镜照片 二、培养及生化特性 * 细菌专性需氧，初代分离（5-10％ CO2） * 血清、血液、肝汤、葡萄糖—促进生长 * 初分离生长缓慢（7-14天），传代（2-3天） * 菌落有光滑(S)型、粗糙（R）型和黏液(M)型 血液肝汤琼脂：形成灰白色菌落，不溶血 肝汤肉汤：轻度混浊、粘稠沉淀物 血清肝汤琼脂：无色透明、湿润、闪光的小菌落 血液琼脂上菌落 3.生化特性 ﹢ 尿素酶试验 不同型抑菌 效果有差异 染料抑菌试验 （复红、硫堇） 牛型 H2S 产生 牛、羊型 CO2 需要 ﹢ 葡萄糖发酵 － 溶血试验 － 吲哚试验 － 甲基红试验 ﹢ H2O2 ﹢ 硝酸盐试验 结果 试验名称 布鲁氏菌部分生化试验特性 马尔他布氏杆菌(羊型）：生物型1-3 流产布氏杆菌（牛型）：生物型1-9 猪布氏杆菌：生物型1-5 绵羊布氏杆菌： 沙林鼠布氏杆菌： 犬布氏杆菌： 三、种和生物型 该属包括 6个种 20个生物型 布鲁氏菌的发展史 小猎犬 美国 Carmichael 犬布鲁氏菌 1966 沙漠森林野鼠 美国 Stoennen 沙林鼠布鲁氏菌 1956 公绵羊 新西兰 Buadle 绵羊附睾 布鲁氏菌 1953 猪 美国 Traun 猪布鲁氏菌 1914 牛 丹麦 Bruce 牛布鲁氏菌 1897 羊 马尔他 Bruce 羊布鲁氏菌 1887 宿主 国家 发现人 菌名 年份 四、抗原性 * 细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物 A抗原与M抗原： * 抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上 * 光滑型布氏杆菌具有A和M两种表面抗原 R抗原： * 非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。 —包括 A、M 及 R抗原（表面抗原） 属外抗原 属内抗原 六、抵抗力 本菌对外界环境的抵抗力较强 * 在污染的土壤和水中可存活1-4个月 * 咸肉中40日，羊毛中1.5-4月 * 皮毛2-4个月，乳、肉食品中约2个月，粪便中120d 对湿热的抵抗力不强 * 60℃-30min或70℃-5min即杀死、煮沸立即死亡 * 对消毒剂的抵抗力也不强 致病因子 * 引起人和多种动物（60多种）的布病 结构毒力因子： 毒力相关因子：如过氧化氢酶、尿素分解酶等 内毒素（细胞壁的脂多糖-LPS) 外膜蛋白（OMP) 七、致病性 主要—绵羊、山羊；另外牛、猪、鹿、骆驼、人等 马尔他布氏杆菌（羊布氏杆菌） 主要—牛、马、犬；另外也感染水牛、羊、鹿人等 流产布氏杆菌（牛布氏杆菌） 主要—猪； 另外也感染牛、羊、鹿、人等 猪布氏杆菌 易感动物：牛、羊、猪，其次马、鹿、骆驼。 人亦易感，家禽较少感染 * 细菌在胞内寄生（肝、脾、骨髓、吞噬细胞等） 故治疗较难和彻底 感染途径：主要消化道，其次皮肤、粘膜、伤口、 生殖道。呼吸道较少感染。 动物感染 * 一般无明显临床症状，多属隐性传染 * 病变多局限于生殖器官 流产、睾丸炎、乳腺炎、子宫炎、关节炎等 布鲁氏菌 消化道 皮肤粘膜 呼吸道 淋巴液 局部淋巴结 感染量少、毒力弱 机体抵抗力强 布氏菌在淋巴结内局限 感染量大、毒力强 机体抵抗力弱 血行播散（菌血症、败血症、毒血症） 多发性病灶形成 迁延性病灶 病灶外播散 残余变态（消散、纤维化） 隐性感染 痊愈 慢性期 急性期 治疗 布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄） 布氏杆菌病 流产胎儿（7月龄），皮下水肿 母猪子宫内死胎 布氏杆菌病 流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死 八、微生物学诊断 * 因表现为慢性或隐性感染 — 血清学检查 变态反应检查 细菌学检查—流产 （1）细菌学检查 （2）血清学检查 （3）分子生物学诊断 （1）细菌学检查 流产胎儿胃内容物、流产胎盘和羊水、道分泌物 病料: 血液、骨髓、脊脑液、关节液、乳清、内脏等 革兰氏染色——革兰氏阴性菌 柯兹洛夫斯基染色——呈红色球杆菌或短杆菌 形态学及染色特性观察： 分离培养： 生化特性检查： 菌落生长时间和形态 （2）血清学检查 凝集试验 试管凝集试验 虎红平板凝集试验 试管凝集试验 补体结合试验 酶联免疫吸附检测（ELISA） 抗球蛋白试验 乳汁环状试验 皮肤过敏反应 反应强度 时间（月份） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1