细菌的形态、染色.pptx

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微生物的分类 微生物:包括细菌、支原体、衣原体、螺旋体、放线菌、立克次体、病毒及真菌。微生物的生物学性状包括:形态结构、染色特性、生长繁殖与培养、理化性状、分类等。第一页,共四十一页。细 菌 细菌 广义——所有原核细胞型微生物(细菌、支原体衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌) 共性:有细胞壁、原始核质、二分裂、对抗生素敏感 狭义——专指其中的细菌第二页,共四十一页。 细菌的大小与形态观察细菌常用光学显微镜,其大小用测微尺在显微镜下进行测量,以微米(μm)为单位。不同种类的细菌大小不一,同一种细菌也因菌龄和环境因素的影响而有差异。细菌按其外形,主要有球菌杆菌螺形菌第三页,共四十一页。 球状、杆状和螺旋状第四页,共四十一页。一、 球 菌(1)双球菌双球菌 分裂后两个球菌成对排列的为双球菌. 如肺炎双球菌第五页,共四十一页。脑膜炎奈瑟菌肺炎链球菌双球菌第六页,共四十一页。双球菌第七页,共四十一页。 (2)链球菌 分裂是沿一个平面进行,分裂后细胞排列成链状.如乳链球菌链球菌第八页,共四十一页。链球菌第九页,共四十一页。链球菌第十页,共四十一页。 (3)葡萄球菌 分裂面不规则,多个球菌聚在一起,像一串串葡萄。 如金黄色葡萄球菌 葡萄球菌第十一页,共四十一页。葡萄球菌第十二页,共四十一页。葡萄球菌第十三页,共四十一页。 (4)四联球菌 分裂是沿两个相垂直的平面进行,分裂,分裂后每四个细胞在一起呈田字形. 如四联微球菌 四联球菌第十四页,共四十一页。四联球菌第十五页,共四十一页。四联球菌第十六页,共四十一页。 (5)八叠球菌 按三个互相垂直的平面进行分裂后,每八个球菌在一起成立方体形. 如藤黄八叠球菌 八叠球菌第十七页,共四十一页。八叠球菌第十八页,共四十一页。大中小炭疽芽胞杆菌 3-10 μm大肠埃希菌 2-3 μm布鲁菌 0.6-1.5 μm 二、 杆菌不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。第十九页,共四十一页。白喉棒状杆菌炭疽芽胞杆菌杆菌的形态多样第二十页,共四十一页。梭状芽孢杆菌第二十一页,共四十一页。双歧杆菌分枝杆菌杆菌的形态多样第二十二页,共四十一页。球杆菌第二十三页,共四十一页。链杆菌第二十四页,共四十一页。棒状杆菌分枝杆菌第二十五页,共四十一页。螺菌弧菌螺杆菌三、螺形菌第二十六页,共四十一页。弧 菌螺 菌第二十七页,共四十一页。细菌的革兰氏染色革兰氏染色法由Gram发明,沿用至今已有100多年历史。是临床细菌学中最简单、最重要的方法之一。染色后把细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。第二十八页,共四十一页。革兰染色的意义1.鉴别细菌2.选择药物参考 G+ 菌的敏感药物:青霉素 G- 菌的敏感药物:链霉素、氯霉素3.与致病性有关 G+ 菌的致病物质:产生外毒素 G- 菌的致病物质:产生内毒素第二十九页,共四十一页。方法1.涂片 (layering a film)2.干燥 (air-dry)3.固定 (heat-fixing)4.初染 (first stain)5.媒染 (stain with iodine)6.脱色 (decolorize)7.复染 ( counter-stain)第三十页,共四十一页。第一步 涂片临床标本和液体培养物:直接涂片固体培养基上的细菌和不易涂开的标本:取一滴生理盐水置玻片中央,取菌在盐水中磨匀,成1cm2的涂面。技巧:涂片时从中心向外研磨,用力要均匀,厚度以把涂片放到纸上,透过涂片刚好看到下面纸上的字为宜。涂片第三十一页,共四十一页。第二步 干燥涂片最好在室温下自然干燥或将标本面向上,置于火焰上部的热气烘干,切不可在火焰上烤干第三十二页,共四十一页。第三步 固定将已干燥的涂片通过火焰3次,以玻片触及手背皮肤热而不烫为度。目的:1.杀死细菌2.使细菌附着于玻片上3.维持细菌原有形态4.改变细菌对染料的通透性第三十三页,共四十一页。第四步 初染滴结晶紫染液于玻片上,使细菌涂层被全部覆盖,1分钟后,细流水冲洗,甩干。注意:染液必须用水冲洗,而不能直接倒去,以防染液沉渣留在玻片上。第三十四页,共四十一页。第五步 媒染滴加碘液于玻片上,1分钟后,流水冲洗,甩干。在这一步中,碘液作为媒染剂,它的主要作用是促进染料与细菌的结合,也就是初染时结晶紫与细菌的结合,所以媒染剂又叫助染剂。第三十五页,共四十一页。第六步 脱色滴加95%酒精数滴于玻片上,轻轻摇动,不断补充酒精,脱色至流下来的液体无紫色为止,约半分钟,流水冲洗,甩干。这一步在操作中最为关键,脱色时间应以标本涂片厚薄灵活掌握,一般以流下的酒精无紫色为宜。第三十六页,共四十一页。第七步 复染加稀释石碳酸复红数滴,一分钟后流水冲洗,用滤纸吸干玻片表面的水。染色片制备好后,在油镜下观察结果第三十七页,共四十一页。结果正常情况下,细胞的成分与

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