猴痘病原检测技术PPT课件.ppt

疾病预防控制中心 2022年6月20日 猴痘的病原检测技术 内容概要 1 2 3 一、背景 （一）猴痘的发现 猴痘是由猴痘病毒（Monkeypoxvirus, MPXV）感染所致的一种病毒性人兽共患病,临床表现主要为发热、皮疹、淋巴结肿大; 猴痘病毒1958年在绿猴中被发现,1980年消灭了天花并随后停止接种天花疫苗,猴痘已成为公共卫生领域最重要的正痘病毒; 主要发生在中非和西非,病死率为1%-10%,可通过接种疫苗可获得有效保护; （二）疫情概况 A、2022年非洲共有5个国家报告猴痘病例,分别为： 刚果民主共和国（1月1日-5月8日报告1238例,死亡57人） 尼日利亚（1月1日-5月30日报告46例,无死亡） 喀麦隆（2021年12月15日-2022年5月1日报告25例,死亡9人） 中非共和国（3月4日至5月17日报告8例,死亡2人） 刚果共和国（5月21日至5月23日报告2例,无死亡） 一、背景 B、2022年5月7日至26日,全球已有英国、西班牙、葡萄牙、美国、加拿大等23个国家报告猴痘疫情,累计报告确诊病例257例和疑似病例约120例,波及欧洲、北美洲、南美洲、大洋洲（澳大利亚）和亚洲（阿联酋）; C、多国疫情显示,猴痘病毒已发生人际传播,主要为男男同性恋聚集性疫情; 一、背景 （二）疫情概况 二、猴痘特征 （一）病原学 猴痘病毒(MPXV)是全长约197kb的双链DNA病毒,属于痘病毒科正痘病毒属; 病毒可在鸡胚绒毛尿囊膜和来源于人、猴、鼠、兔细胞培养中生长，并引起细胞病变; 病毒形态与其它正痘病毒一致，外形为圆角砖形或卵圆形，大小为 200nm×250nm，外周为30nm 的外膜，环绕匀质的核心体； 有西非和刚果盆地两个分支,病死率约为3.6%和10.6%; 二、猴痘特征 猴痘病毒耐干燥和低温,在土壤、痂皮和衣被上可生存数月; 病毒对热敏感,加热至56℃30min或60℃10min即可灭活,紫外线和一般消毒剂均可使之灭活,对次氯酸钠、氯二甲酚、戊二醛、甲醛和多聚甲醛等敏感; 猴痘病毒与天花病毒、痘苗病毒和牛痘病毒是正痘病毒中对人类致病的 4 种病毒，都含有可溶性抗原、核蛋白抗原和红细胞凝集素，抗原性质基本相同，彼此之间有交叉免疫性； 二、猴痘特征 （二）流行病学 感染动物及猴痘病毒感染者是主要传染源； 猴痘病毒的主要宿主为非洲啮齿类（非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠、睡鼠等）,灵长类（多种猴类和猿类）由于与感染的啮齿类动物接触偶可感染; 1、传染源 二、猴痘特征 病毒经黏膜和破损皮肤侵入人体; 主要通过接触感染动物的呼吸道分泌物、病变渗出物、血液、其它体液,或被感染动物咬伤、抓伤而感染; 人与人之间主要通过密切接触传播,可在长时间近距离接触时通过飞沫传播,接触病毒污染的物品也有可能感染; 病毒还可通过胎盘从孕妇传播给胎儿; 2、传播途径 二、猴痘特征 未接种过天花疫苗的人群对猴痘病毒普遍易感; 3、易感人群 （三）临床表现 潜伏期为5-21天,多为6-13天; 发病早期出现发热、寒战、头痛、嗜睡、乏力、背部疼痛和肌痛等前驱症状;90%患者出现明显的浅表淋巴结肿大,如颈部、腋窝、腹股沟等； 发病1-3天出现皮疹,由面部蔓延至四肢,手心和脚掌均可出现皮疹(皮疹经历斑疹-丘疹-疱疹-脓疱-结痂的阶段;病程约2-4周） 部分患者可出现并发症（皮损部位继发细菌感染、呕吐和腹泻引起的严重脱水、支气管肺炎、脑炎、角膜感染等） 二、猴痘特征 A、符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》(国务院令第424号)和《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定;B、具备国家卫生健康委备案的生物安全三级（BSL-3）实验室及以上实验室条件,并获得从事猴痘病毒实验活动的批准,具备临床基因扩增检验实验室条件；C、独立设置的医学检验实验室应符合《医学检验实验室基本标准（试行）》《医学检验实验室管理规范（试行）》等要求； 三、猴痘病毒实验室检测 （一）实验室资质要求 A.根据《人间传染的病原微生物名录》中的有关规定,猴痘病毒生物危害分类为第一类,是一种高致病性病毒； B.涉及活病毒的样本灭活操作需在BSL-3及以上实验室的生物安全柜内进行; C.灭活样本中的病毒DNA提取可在生物安全二级(BSL-2)实验室或PCR检测的专门区域或房间进行,严格按照分区操作原则操作（试剂储存和准备区、标本制备区、扩增和产物分析区）; 三、猴痘病毒实验室检测 （二）实验室生物安全要求 （三）技术人员要求1、采样人员：生物安全培训合格,熟悉标本种类和采集方法,熟练掌握标本采集操作流程及注意事项,做好标本信息记录,确保标本质量符合要求、标本及相关信息可追溯;2、检测人员：具备相关专业大专以上学历或具有中级及以