两株细菌F85和T113对油菜根肿病生防潜能研究.pdf

两株生防细菌F85 和T113 对油菜根肿病生防潜能研究 目 录 摘 要i Abstract iii 第一章 文献综述1 1 油菜根肿病概况1 1.1 油菜根肿病的发生及分布1 1.2 油菜根肿病的病原及生理分化1 2 根肿病的生物防治研究进展2 3 芽孢杆菌在生物防治中的研究进展3 3.1 芽孢杆菌的生防机制3 3.2 芽孢杆菌的代谢产物4 4 研究目的与意义6 第二章 生防菌F85 和T113 的鉴定、发酵条件优化及防效测定7 1 材料与方法7 1.1 材料7 1.2 方法9 1.2.1 生防菌F85 和T113 分子鉴定9 1.2.2 生防菌F85 和T113 发酵条件优化12 生防菌细菌菌量与吸光度的标准曲线建立 12 根肿菌休眠孢子失活率测定 13 .1 生防菌无菌发酵滤液的制备13 生防菌F85 和T113 发酵液培养基成分的优化14 F85 和T113 摇瓶发酵条件优化15 1.2.3 生防菌F85 和T113 的防治效果测定17 生防菌F85 和T113 的抑菌谱测定17 F85 和T113 对油菜根肿病盆栽防效测定17 F85 和T113 对油菜根肿病田间防效测定17 1.2.4 数据统计与分析18 I 华中农业大学2020 届硕士学位论文 2 结果与分析18 2.1 生防菌F85 和T113 的分子鉴定18 2.2 生防菌F85 和T113 发酵条件优化20 2.2.1 生防菌F85 和T113 菌量与吸光度的标准曲线20 2.2.2 F85 和T113 发酵培养基成分的优化21 2.2.3 F85 和T113 摇培发酵条件优化26 2.2.4 优化后的发酵培养条件32 2.3 生防菌F85 和T113 的防治效果32 2.3.1 生防菌F85 和T113 的抑菌谱32 2.3.2 F85 和T113 对油菜根肿病的盆栽防效33 2.3.3 F85 和T113 对油菜根肿病田间防治效果34 3 讨论35 第三章 生防细菌F85 和T113 的抗菌物质分析37 1 材料与方法38 1.1 材料38 1.1.1 供试菌株38 1.1.2 主要试剂38 1.1.3 仪器设备38 1.2 方法38 1.2.1 F85 和T113 发酵滤液制备38 1.2.2 F85 和T113 发酵滤液的理化性质测定39 1.2.3 抗菌物质的UPLC 和LC-MS 分析39 1.2.4 抗菌物质合成基因的全基因组分析40 2 结果与分析46 2.1 F85 和T113 发酵滤液的理化性质 46 2.1.1 不同温度对生防菌F85 和T113 抗菌物质稳定性影响46 2.1.2 酸碱性对生防菌F85 和T113 抗菌物质稳定性影响47 2.1.3 紫外光对生防菌F85 和T113 抗菌物质稳定性影响48 2.2 抗菌物质的UPLC 和LC-MS 分析49 II 两株生防细菌F85 和T113 对油菜根肿病生防潜能研究 2.2.1 F85 粗提物的抑菌活性跟踪49 2.2.2 F85 抗菌粗提物UPLC 分析50 2.2.3 F85 抗菌粗提物LC-MS 分析51 2.3 F85 和T113 基因组测序及抗菌物质合成基因的全基因组分析 55 2.3.1 全基因组测序质量检测55 2.3.2 基因组基本特征56 2.3.3 基因组功能注释分析58 2.3.4 F85 和T113 抗生素合成相关基因预测67 2.3.5 F85 和T113 抗生素合成相关基因检测71 2.3.6 抗生素合成相关基因RT-PCR 检测72 3 讨论73 第四章 拟南芥应答贝莱斯芽孢杆菌F85 的转录组学分析75 1 材料与方法75