咪鲜胺和嘧霉胺对指状青霉菌的抑制作用及抗性机制研究.pdf

咪鲜胺和嘧霉胺对指状青霉菌的抑制作用及抗性机制研究 目 录 摘 要i ABSTRACTiii 第一章 前 言1 1. 柑橘绿霉病1 2. 甾醇生物合成抑制剂2 2.1 麦角甾醇在生物体内的合成2 2.2 麦角甾醇生物合成抑制剂3 2.3 咪鲜胺4 2.4 指状青霉菌对DMI 类杀菌剂的抗性5 3. 氨基酸和蛋白质合成抑制剂6 3.1 氨基酸和蛋白质合成抑制剂6 3.2 苯胺基嘧啶杀菌剂嘧霉胺8 3.3 植物病原菌对苯胺基嘧啶杀菌剂的抗性9 4. 研究的意义9 第二章 咪鲜胺对指状青霉菌的抑制作用及抗性机制研究11 2.1 材料与方法11 2.1.1 供试菌株与寄主11 2.1.2 供试药剂及试剂12 2.1.3 仪器设备12 2.1.4 培养基制备和母液配制12 2.1.5 指状青霉菌对咪鲜胺相对敏感性基线的建立13 2.1.62017年和2018年采集的指状青霉菌对咪鲜胺敏感性差异13 2.1.7 咪鲜胺对绿霉病的防效13 2.1.8 咪鲜胺对指状青霉菌微观形态的影响14 2.1.9 咪鲜胺对指状青霉菌孢子细胞膜完整性的影响14 2.1.10 咪鲜胺对指状青霉菌菌丝细胞膜通透性的影响15 2.1.11 咪鲜胺对指状青霉菌菌丝中甘露聚糖含量的影响15 2.1.12 咪鲜胺对指状青霉菌菌丝中麦角甾醇含量的影响16 I 2.1.13 咪鲜胺敏感和抗性菌株CYP51基因序列分析17 2.1.14 咪鲜胺敏感和抗性菌株CYP51基因表达量测定20 2.1.15 数据处理与分析21 2.2 结果与分析21 2.2.1 指状青霉菌对咪鲜胺的相对敏感性基线21 2.2.22017年和2018年采集的指状青霉菌对咪鲜胺敏感性差异22 2.2.3 咪鲜胺对绿霉病的防效23 2.2.4 咪鲜胺对指状青霉菌微观形态的影响23 2.2.5 咪鲜胺对指状青霉菌孢子细胞膜完整性的影响24 2.2.6 咪鲜胺对指状青霉菌菌丝细胞膜通透性的影响25 2.2.7 咪鲜胺对指状青霉菌菌丝中甘露聚糖含量的影响25 2.2.8 咪鲜胺对指状青霉菌菌丝中麦角甾醇含量的影响26 2.2.9 咪鲜胺敏感和抗性菌株CYP51基因序列27 2.2.10 咪鲜胺敏感和抗性菌株CYP51基因表达量29 2.3 讨论31 第三章 嘧霉胺对指状青霉菌的抑制作用及抗性机制研究34 3.1 材料与方法34 3.1.1 供试菌株与寄主34 3.1.2 供试药剂及试剂34 3.1.3 仪器设备35 3.1.4 培养基制备、母液配制和菌株分离纯化35 3.1.5 指状青霉菌对嘧霉胺相对敏感性基线的建立35 3.1.6 嘧霉胺对指状青霉菌菌丝中纤维素酶活性的影响36 3.1.7 嘧霉胺对指状青霉菌菌丝中果胶酶活性的影响37 3.1.8 嘧霉胺对指状青霉菌菌丝中甲硫氨酸含量的影响39 3.1.9 嘧霉胺抗性突变体的室内诱导40 3.1.10 嘧霉胺敏感和抗性菌株对果实致病力测定41 3.1.11 嘧霉胺敏感和抗性菌株抗逆境能力41 3.1.12 甲硫氨酸对嘧霉胺毒力缓解作用41