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茶叶品质形成的基因
本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种茶树myb类转录因子基因及其编码蛋白和应用。
背景技术:
茶树(camelliasinensis(l.)o.kuntze)是我国重要的经济作物。茶叶富含氨基酸、生物碱、茶多糖、多酚类和挥发类等物质,这些内含物含量和组分的不同,共同赋予了茶叶色、香、味等品质特征。茶毫是茶树重要的农艺性状,其丰富多样的次生代谢物不仅是茶叶品质形成的关键,而且对茶树逆境胁迫响应具有重要作用。茶毫是一种茶叶单细胞类型表皮毛,主要分布在幼嫩的芽叶背部,长度依叶序而异,并随着幼叶成熟而自行脱落,至成熟叶基本全部脱落。茶毫中含有18种人体所需要的氨基酸、多酚类物质和咖啡碱,以及含量丰富的挥发类物质,对成茶的外观、滋味和香气都具有重要贡献。茶毫对多种名优茶的外形有着画龙点睛的作用,如工夫红茶、烘青、白茶等都要求显毫。因此,芽叶茶毫的多少,已经成为茶叶原材料幼嫩和优质的标志,而成茶毫的多少及隐显亦是评定茶叶品质优劣的重要因素之一。
表皮毛除了作为植物抵御外界病虫害、天敌取食等第一道物理屏障外,也能通过合成、积累或分泌大量的次生代谢产物来抵御外界胁迫。螨类和假眼小绿叶蝉是危害茶树生长的两类重要害虫,大量的研究表明,茶毫的富集对这两种害虫的取食具有阻碍作用。也有研究表明,茶毫由于木质素含量高,阻碍某些鳞翅目害虫的取食和产卵。前人的研究表明,茶毫在茶树抵御外界病虫害侵害以及非生物逆境胁迫中,具有重要作用。茶毫对茶树生理生长和成茶品质都具有重要影响,但是其形成的分子机理尚不清楚,严重阻碍了我们对茶树发育生物学和茶叶品质形成机理的深入认识。
在茶树叶片的发育和成茶的品质形成以及茶树对外界逆境胁迫响应,茶毫都起着非常重要的作用,随着茶树基因组数据的公布,为我们从分子水平解析茶毫发育机理提供了理论参考。对茶毫发育、生物学功能的研究,将能更好地丰富植物表皮毛的发育机理,以及为优质、抗逆基因工程育种提供优秀的基因资源。
技术实现要素:
本发明要解决的技术问题是提供一种来源于茶树的调控茶毫发育和茶叶品质形成的基因(下称csmyb184基因或转录因子)。
本发明要解决的另外一个技术问题是提供上述csmyb184基因在茶毫发育和茶叶品质形成中的应用。
对于csmyb184基因,本发明提供的技术方案是,一种具有调控茶毫发育和茶叶品质形成的基因,其核苷酸序列如seqidno.1所示,其编码氨基酸序列如seqidno.2所示。
本发明还包括上述csmyb184基因在茶毫发育和茶叶品质形成方面的应用。
本发明的有益效果是:
首次克隆并验证了控制茶毫发育的关键转录因子,同时该转录因子还调控茶叶特征性化合物合成,影响茶叶品质形成,本发明还提供了含有csmyb184基因的重组质粒、转基因工程菌和转基因植株。本发明丰富了茶树发育生物学的认知,以及茶树次生代谢调控新的机制。本发明为实现茶树选择性农艺性状育种提供了理论和实际参考基础。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1是本发明实施例2的茶树不同组织茶毫分布差异和csmyb184编码蛋白的表达差异。以富毫茶树品种福鼎大白为研究材料,不同组织中茶毫分布和csmyb184表达模式高度正相关。
图2是本发明实施例2的茶毫分布差异显著的茶树品种中csmyb184编码蛋白的表达差异。茶毫显著富集品种:fddb,福鼎大白;djbh,短节白毫;tydy,桃源大叶。茶毫显著少品种:hjg,黄金桂;lj,龙井;hk,黄魁。a,六种茶树品种的一叶的茶毫表型。b,不同茶树品种中茶毫密度定量分析。c,不同茶树品种中茶毫长度定量分析。d,不同茶树品种中csmyb184及相关基因表达模式。
图3是本发明实施例3的csmyb184基因能完全互补拟南芥表皮毛发育缺陷突变体gl1的表型。a,半定量分析csmyb184在突变体gl1、野生型ws和转基因csmyb184/gl1中表达分析。b,突变体gl1、野生型ws和转基因csmyb184/gl1表皮毛表型观测。c,拟南芥中gl1下游靶基因atgl2和atgl3表达分析。
图4是本发明实施例4的csmyb184基因调控茶树叶片特征性化合物合成积累。a,寡核苷酸反义抑制实验示意图,一芽一叶材料取自于福鼎大白品种,control,空白对照;asodn-csmyb184,csmyb184寡核苷酸反义链抑制处理。b,空白对照和csmyb184寡核苷酸反义链抑制处理材料中咖啡碱、儿茶素类和没食子酸化合物含量变化。表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg),表儿茶素没食子酸酯(ecg),表没食子儿茶素(egc),表儿茶素(ec),儿茶素(c),没食子酸(ga)空白对照和csmyb184寡核苷酸反义链抑制处理材料中主要挥发类物质含量检测。
图5本发明实施例4
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