技术路线图(国自然).pdf

“实验万事屋”出品 技术路线例子1 （蓝色已完成，紫色为实验目的） 前期工作 （已发表SCI） 组织标本证实XX是重要 的抑癌因子 XX在乳腺癌组织中表达下调/ 缺失、癌旁高表达 肿瘤组织和癌旁 XX 细胞实验功能验证 组织亚细胞定位 不同 MDA-MB-231细胞 MCF-7细胞低表达 较高表达 XX 过表达 XX-RNAi 体外功能实验 +/-功能验证 初步分子 增殖曲线 细胞周期 克隆形成 迁移实验 侵袭转移实验 机制 在体水平动物实验： 裸鼠成瘤 XX在体水平功能证实 XX在抑制乳腺癌癌变发生中发 挥关键作用 XX在乳腺癌中确切的分子调控机 制 深度测序分析XX 改变引起 Pathway Array检测凋亡、侵 收集临床300例乳癌样本 的基因表达谱的改变 袭转移相关通路蛋白表达变化 根据下游靶分子群，利用生物信息软 制备组织芯片，检测分析XX 的表达、亚 件Genes2Networks、Go-anaslysis建 细胞定位，回顾性分析XX和肿瘤预后、 分型的相关性 立XX调控相关的信号通路 GST pulldown联合Co-IP 实验验 ChIP联合芯片技术鉴 验证XX 下游关键调控分子在 证与XX 直接相互作用的蛋白 定与XX发生相互作用 临床样本中的表达情况 的基因DNA DNA结合验证 XX蛋白结构生物信息 证实XX抑制癌变发生的功 学分析 能作用和效应通路 qPCR实验验证XX 的结合