2011级研细胞培养第2讲细胞生长条件和培养室建设.pdf

第二章第二章 细胞培养的条件细胞培养的条件 第二章第二章 细胞培养的条件细胞培养的条件 • 营养 •无菌无毒的培养环境 • 温度 •无污染的操作环境 • pH •无菌室 • 渗透压 • O •恒温培养箱 2 • CO •超净工作台 2 第一节第一节 第一节第一节 细胞的营养和影响细胞生长的因素细胞的营养和影响细胞生长的因素 细胞的营养和影响细胞生长的因素细胞的营养和影响细胞生长的因素 第二节第二节 第二节第二节 细胞培养室建设细胞培养室建设 细胞培养室建设细胞培养室建设 第一节 细胞的营养和 影响细胞生长的因素 一、一、细胞的营养需要细胞的营养需要 一一、、细胞的营养需要细胞的营养需要 二、二、影响细胞生长的因素影响细胞生长的因素 二二、、影响细胞生长的因素影响细胞生长的因素 一、一、细胞的营养需要细胞的营养需要 一一、、细胞的营养需要细胞的营养需要 （一（一））氨基酸氨基酸 （（一一））氨基酸氨基酸 （二（二））碳水化合物碳水化合物 （（二二））碳水化合物碳水化合物 （三（三））维生素维生素 （（三三））维生素维生素 （四（四））无机盐无机盐 （（四四））无机盐无机盐 （五（五））微量元素微量元素 （（五五））微量元素微量元素 （六（六））脂肪酸和脂类物质脂肪酸和脂类物质 （（六六））脂肪酸和脂类物质脂肪酸和脂类物质 （七（七））促生长因子促生长因子 （（七七））促生长因子促生长因子 氨基酸氨基酸 氨基酸氨基酸 • 合成蛋白质的原料，也是细胞重要的能量来源 • 种类及数量影响着细胞的密度、增殖、活力等诸多方面 • 几乎所有的细胞均需要12种必要的氨基酸：精氨酸、缬氨酸、 酪氨酸、组氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、赖 氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、胱氨酸 • 添加一定量的非必需氨基酸能够减少细胞合成这些氨基酸的 代谢负担 • 比如：谷氨酰胺对细胞培养非常重要，是细胞合成核酸和蛋 白质必须具有的氨基酸。在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良 而死亡，肿瘤细胞培养时，谷氨酰胺需求量比正常细胞高一 倍。 促生长因子促生长因子 促生长因子促生长因子 （somatomedin，SM ） • 肽激素类：胰岛素、表皮生长因素 （EGF ）、成纤细胞生长因 素（FGF ）、血小板来源生长因子 （PDGF ） • 皮质醇、甲状腺素 （T ）也属于促生长因子 3 • 作用：促进细胞生长增殖，维持细胞的功能和分化状态 • 胰岛素：能促使细胞利用葡萄糖和氨基酸，促进有丝分裂作用 • 氢化可的松：对皮肤上皮细胞及乳腺上皮细胞增殖生长有促进 作用，提高神经胶质细胞和成纤维细胞的克隆形成率 • 血清中含有多种促细胞生长的因子，是体外培养细胞所需生长 因子的重要来源 简简 称称 名名 称称 分子分子量量 简简 称称 名名 称称