(1.4.11)--生化实验胰岛素血糖测定.ppt

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*实验项目十八

胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响教学目的：一、掌握激素对血糖浓度影响的原理；Nelson—Somogyi法测定血糖浓度的原理和操作过程；离心机的使用。。

二、熟悉血糖测定的临床意义。

三、了解皮下注射的方法原理：

胰岛素可以降低血糖

肾上腺素可以升高血糖。

原理：Nelson—Somogyi法

用ZnSO4与Ba（OH）2作用生成Zn（OH）2—BaSO4胶体沉淀来沉淀血清中的蛋白质。取上清得到无蛋白血滤液。

无蛋白血滤液与碱性铜盐共热，使Cu2+被葡萄糖还原为Cu2O，Cu2O与砷钼酸试剂反应生成钼蓝，通过比色分析得到血糖浓度。操作步骤

一、取2支空腹16小时的家兔，编号并称重。

二、从耳缘静脉取血约2-3mL滴入加有抗凝剂的小瓶中（得到肾前、胰前两个血样）。

三、皮下注射激素：

1号注射肾上腺素（0.1%,0.2mL/kg）

2号注射胰岛素（2IU/kg）

四、注射肾上腺素后30分钟，注射胰岛素后60分钟再次取血（得到肾后、胰后两个血样）。操作步骤

五、用微量加样器准确吸取0.1mL被检血样，放入干燥清洁的小试管底部。加入4.5%

Ba（OH）20.95mL及5%ZnSO40.95mL，混匀后离心（3000rpm，5分钟），取上清（用微量加样器）得到无蛋白血滤液（血糖浓度被稀释了20倍）。

操作步骤

六、取干燥清洁的10mL试管六支，编号和加样见下表：0.250.250.250.250.250.250.50.50.50.50.50.5无蛋白血滤液标准葡萄糖蒸馏水碱性铜盐肾前胰前肾后胰后标准管空白管管号试液（mL）*

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