川芎调节血脑屏障通透性的作用及机制研究.docxVIP

·138·中草药2024年1月第55卷第1期ChineseTraditionalandHerbalDrugs2024JanuaryVol.55No.1

川芎调节血脑屏障通透性的作用及机制研究

刘明妍1,2，刘力榕1,2，冯梦晗1,2，朱美霞1,2，张银环1,2，闫晓宁1,2，方聪1,2，屈碧琼1,2，贾志鑫2,3，

刘洁2,3，肖红斌2,3*

1.北京中医药大学中药学院，北京102400

2.北京中医药大学中药分析与转化研究中心，北京102400

3.北京中医药大学北京中医药研究院，北京102400

摘要：目的探讨川芎ChuanxiongRhizoma调节血脑屏障通透性的作用特点，并从紧密连接蛋白、外排蛋白表达、埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白（ezrin/radixin/mesin，ERM）磷酸化水平变化的角度阐述影响血脑屏障通透性的机制。方法小鼠单次给予川芎提取物（5.8g/kg）后iv不同相对分子质量（4×103、4×104、7×104、1.5×105）的异硫氰酸荧光素-葡聚糖（fluorescein isothiocyanate-dextran，FITC-dextran），测定给药后0、0.5、1、2、4、6、8h脑组织中FITC-dextran的荧光强度，定量描述川芎对体内血脑屏障通透性的影响。建立bEnd.3细胞单培养血脑屏障模型，给予川芎单体成分洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、阿魏酸、洋川芎内酯I、藁本内酯、欧当归内酯A、4-羟基-3-丁基苯酞，比较相同作用时间内血脑屏障模型中荧光素钠（fluoresceinsodium，Na-F）的表观渗透系数（apparentpermeabilitycoefficient，Papp），确定各成分开放血脑屏障的效应。采用Westernblotting检测川芎提取物给药前后小鼠脑组织及洋川芎内酯I给药bEnd.3细胞中闭锁小带蛋白1（zonulaoccluden- 1，ZO-1）、闭锁蛋白（Occludin）、P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）、血管内皮细胞钙黏合素（VE-cadherin）、p-ERM/ERM的表达水平。结果川芎提取物给药0.5h后可显著增加小鼠脑组织中FITC-dextran（相对分子质量4×103）的透过量（P<0.001），作用强度随给药时间延长减弱，但对相对分子质量4×104、7×104、1.5×105的FITC-dextran透过量无影响。在脑组织中，川芎提取物给药0.5h时下调ZO-1、Occludin蛋白表达（P＜0.05），上调P-gp蛋白表达；给药2h时上调ZO-1、Occludin蛋白表达（P＜0.05、0.01），下调P-gp蛋白表达（P＜0.01）；给药8h时，ZO-1、Occludin、P-gp的蛋白表达水平与对照组无明显差异。不同浓度（1、10、100μmol/L）的洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、阿魏酸8h给药时间内显著增加Na-F透过血脑屏障模型的Papp，其中洋川芎内酯I的促透效应最强。洋川芎内酯I（10μmol/L）给药bEnd.3细胞0.5h时可下调Occludin、ZO-1、p-ERM/ERM的蛋白表达（P＜0.01），给药1h时上调Occludin、ZO-1、p-ERM/ERM的蛋白表达（P＜0.01），给药8h时Occludin、ZO-1、p-ERM/ERM的蛋白表达水平与对照组无明显差异。结论川芎在一定程度上可增加血脑屏障通透性，且该作用具有时效性，其机制与调节Occludin、ZO-1、P-gp的蛋白表达及ERM磷酸化水平有关。

关键词：川芎；血脑屏障通透性；闭锁蛋白；闭锁小带蛋白1；P-糖蛋白；埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白；洋川芎内酯A；洋川芎内酯H；阿魏酸；洋川芎内酯I；藁本内酯；欧当归内酯A；4-羟基-3-丁基苯酞

中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：0253-2670(2024)01-0138-10

DOI:10.7501/j.i