甲流乙流毒检测进展（10页）.pptx

陕西省中医医院检验科 王荔敏 甲流乙流病毒检验进展 流感的分型 ■ 流感病毒属于RNA病毒 。 流行性感冒是由甲（A) 、 乙（B） 、 丙（C） 三型流感病毒引起， ■ A型流感病毒常以流行形势出现 ， 能引起世界性流感大流行 ， 它在动物中广泛分布 ， 并也能在 动物中引起流感流行和造成大量动物死亡； ■ B型流感病毒常常引起局部暴发 ， 不引起世界性流感大流行； ■ C型流感病毒主要以散在形式出现 ， 主要侵袭婴幼儿 ， 一般不引起流行 。 ■ 目前感染人的主要是甲型流感病毒中的H1N1 、H3N2亚型及乙型流感病毒中的Victor ia和 Yamagata系 。 流感的分型 ■ 外周血常规： 白细胞总数一般不高或者降低 ， 重症病例淋巴细胞计数明显降低 ■ 血生化： 部分病例出现低钾血症 ， 少数病例肌酸激酶 、 天门冬氨酸氨基转移酶 、 丙氨酸氨基 转移酶 、 乳酸脱氢酶 、肌酐等升高 。 流感的实验室检查 病原学相关检查 ■ （ 1） 病毒核酸检测： 以RT-PCR（最好采用real-time RT-PCR） 法检测呼吸道标本（咽拭子、 鼻拭子 、 鼻咽或气管抽取物 、痰） 中的流感病毒核酸 。 病毒核酸检测的特异性和敏感性最好 ， 且能区分病毒类型和亚型 ■ （ 2） 病毒抗原检测（快速诊断试剂检测） ： 快速抗原检测方法可采用胶体金和免疫荧光法 。 由于快速抗原检测的敏感性低于核酸检测 ， 因此对快速抗原检测结果的解释应结合患者流行 病史和临床症状综合考虑 ■ （ 3） 血清学检测： 检测流感病毒特异性IgM和IgG抗体水平 。 动态检测的IgG抗体水平恢复期 比急性期有4倍或以上升高有回顾性诊断意义 ■ （4） 病毒的分离培养和鉴定： 属于金标准 ， 在流感流行季节 ， 流感样病例快速抗原诊断和免 疫荧光法检测阴性的患者建议再做病毒分离 ■ 病毒抗原检测（快速诊断试剂检测） ■ 血清学检测 （呼吸道病毒检测） 目前我院检验科流感病毒开展的项目 病毒抗原检测流程 ■ 1 . 大夫留取标本 ， 立即送检； ■ 2 . 检验科工作人员接收标本； ■ 3． 检验科人员接收标本半个小时后在检验科门诊四楼窗口打化验单； 病毒抗原检测流程 病毒抗原检测的标本采集 ■ 咽喉拭子（推荐） ： 用灭菌过的棉签从口腔完全插入咽喉中 ， 以咽后壁 、 上鄂 、 扁桃体发红 部位为中心 ， 摩擦数次 ， 采集粘膜表皮 ■ 鼻腔拭子： 用灭菌过的棉签完全插入鼻腔中 ， 摩擦鼻甲数次 ， 采集粘膜表皮 。 ■ 鼻腔抽洗液： 抽吸器的一侧的管子连接在抽吸泵上 ， 另一侧的管子从外鼻孔完全插入鼻腔 ， 启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中 。将棉签浸入到鼻腔抽洗液 ， 使标本沾到棉签上 。 ■ 注意： 应使用泡沫或人造丝材质的棉签采集样本!样本采集后应尽快送检 ， 如果不能及时送检， 应室温储存在密闭容器中 ， 但不可超过24小时 ， 样本处理和储运不合适 ， 可能会造成假阴性 。 采集用的棉签到检验科塔楼二楼领取 。 病毒抗原检测的标本采集 ■ 普通甲流抗原（H1N1及其亚型 ， H3N2及其亚型 ， H5N1及其亚型 ， H9N2及其亚型 ， H7N3及 其亚型 ■ 乙型流感抗原（Br ig it , B/R5 HongKong/5/72 Russia/69 Lee/40） 病毒抗原检测内容 ■ 原理： 加入充分裂解的临床样本后 ， Flu抗原在试剂条的前段与胶体金标记的Flu抗体结合 ， 形成抗原-抗体复合物 ， 该复合物在试剂膜上层析流动 ， 经Flu单克隆抗体条带（FluA或FluB 测试线） 时再次结合Flu单克隆抗体 ， 形成双抗体夹心 ， 并显示紫红色条带 。 ■ 方法： Flu检测试剂运用胶体金标记和免疫层析技术 ， 检测临床样本中的Flu抗原并以可视信 号的方式直接显示结果 。 病毒抗原检测的方法和原理 病毒抗原检测结果的解读 ■ 阳性 样本中含有Flu抗原, ■ 阴性 样本中不含Flu抗原 ， 或者含量低于本产品的检测水平 ■ 建议对阴性结果的样本进行微生物培养以确定是否感染流感 ， 若培养结果与检测结果不同， 应再次取样进行微生物培养复查 病毒抗原检测结果的解读 病毒抗原检测方法的局限性 ■ 可快速检测甲型和乙型流感病毒 ， 诊断应结合临床症状 、病毒分离培养等其他检查结果 ， 由 医生综合判断进行确诊 ■ Flu病毒已失活的情况下样本中仍可能有Flu抗原 ■ Flu检测试剂结果为阴性并不排除患者Flu感染的可能性 ， 取样不充分或操作方法不当 ， 以及 样本中抗原水平低于检测限均会导致假阴性 ■