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实验五、PCR扩增16SrDNA o
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一、实验原理 e.
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1、PCR i
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• 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction)简称ＰＣＲ
.
技术，是８０年代中期发展起来的一种体外扩增特异Ｄ
物w
ＮＡ片段的技术。此法操作简便， 可在短时间内在试管
生w
中获得数百万个特异的目的ＤＮＡ序列的拷贝，ＰＣＲ
易w
技术虽然问世仅数年时间， 但它已迅速渗透到分子生物
学的各个领域，引起了生物技术发展的一次革命，目前
它在分子克隆， 目的基础检测，遗传病的基因诊断，法
医学，考古学等方面得到了广泛的应用。
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•ＰＣＲ技术实际上是模拟体内DNA合成过程，
是在模板ＤＮＡ， 引物和４种脱氧核苷酸存在
i
的条件下依赖于ＤＮＡ聚合酶的酶促合反应，
b
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ＰＣＲ技术的特异性取决于引物和模板ＤＮＡ
物 .
结合的特异性。 反应分三步：①变性
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（denaturation）；②退火（annealing）；③
易 w
延伸（ex tension），反应过程见图。
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