化妆品菌类检测剖析.doc

- . z. 化装品中菌类的检测 一、菌落总数的检测 1.检测菌落总数的意义 菌落总数(aerobic bacterial count)是指化装品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等)，1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进展卫生学总评价的综合依据。 2．操作步骤及检验结果 〔1〕检验步骤 ①用灭菌吸管吸取1:10稀释的检液2mL，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1mL。另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面)，更换一支吸管，并充分混匀，制成1:100检液。吸取2mL，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1mL。如样品含菌量高，还可再稀释成1:1000，1:10000，……等，每种稀释度应换1支吸管。 ②将融化并冷至45℃～50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内，每皿约15mL，随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h。另取一个不加样品的灭菌空平皿，参加约15mL ③为便于区别化装品中的颗粒与菌落，可在每100mL卵磷脂吐温80营养琼脂中参加1mL0.5%的TTC溶液，如有细菌存在，培养后菌落呈红色，而化装品的颗粒颜色无变化。 〔2〕菌落计数方法 先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。假设平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。假设片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，以代表全皿菌落数。 〔3〕 菌落计数及报告方法 ①首先选取平均菌落数在30～300个之间的平皿，作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表1中例1)。 ②假设有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两菌落总数之比值来决定，假设其比值小于或等于2，应报告其平均数，假设大于2则报告其中稀释度较低的平皿的菌落数(见表1中例2及例3)。 ③假设所有稀释度的平均菌落数均大于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例4)。 ④假设所有稀释度的平均菌落数均小于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1例5)。 ⑤假设所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例6)。 ⑥假设所有的稀释度均无菌生长，报告数为每g或每mL小于10CFU。 ⑦菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示(见表1报告方式栏)。在报告菌落数为"不可计〞时，应注明样品的稀释度。 表1 菌落计数结果及报告方式 例 次 不同稀释度平均菌落数 10-1 10-2 10-3 两稀释度 菌数之比 菌落总数 CFU\ml或 CFU/g 报告方式 CFU/mL或 CFU/g 1 1365 164 20 ─ 16400 16000 或 1.6×104 2 2760 295 46 1.6 38000 38000或3.8×104 3 2890 271 60 2.2 27100 27000 或 2.7×104 4 不可计 4650 513 ─ 513000 510000 或 5.1×105 5 27 11 5 ─ 270 270或 2.7×102 6 不可计 305 12 ─ 30500 31000 或 3.1×104 7 0 0 0 ─ ＜１×10 ＜10 ＊CFU：菌落形成单位。 二、粪大肠杆菌的检测 1.检测粪大肠杆菌的意义 大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表*一个或*一属细菌，而指的是具有*些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃ 大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示化装品中有否粪便污染。大肠菌群数的上下，说明了粪便污染的程度，也反映了对人体安康危害性的大小。是重要的卫生