恩拉霉素含量测定方法的改进-《湖北畜牧兽医》(2013年6期).docx

龙源版权所有 恩拉霉素含量测定方法的改进作者：朱曦 董文婷 胡深 梁利妺来源：《湖北畜牧兽医》2013年第06期 摘要：针对《进口兽药质量标准》1999年版收录的恩拉霉素预混剂含量测定方法中部分检测条件进行了适当的改进，将pH 4.0醋酸盐缓冲液改为pH 7.8的磷酸盐缓冲液，检验用菌株改为金黄色葡萄球菌，培养基改为Ⅱ号pH 7.8的培养基，终浓度由10～40 U/mL改为100～400 U/mL，由振摇30 min改为超声提取90 min。优化了检验条件，使检验结果更精准可靠。 关键词：恩拉霉素；效价测定；微生物检定法 中图分类号：S859.79+6 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2013）06-0015-02 恩拉霉素（Enramycin）是由放线菌（Streptomyces fungicidicus）发酵而得，其包括13个不同种类的17个氨基酸分子和脂肪酸分子所组成的有机碱。其中氨基酸分子构成环状多肽结构，脂肪酸位于多肽结构末端，据其末端脂肪酸种类不同，分为恩拉霉素 A（C107H138Cl2N26O31）和恩拉霉素B（C108H140Cl2N26O31）。恩拉霉素对革兰氏阳性菌有很强的抑制作用，如梭状芽孢杆菌、链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌等革兰氏阳性菌均具有很强的抑制作用。尤其是对梭状芽孢杆菌（Clostridium）作用更加显著。恩拉霉素不同于其他抗生素的是长期使用后不容易产生耐药性，并能促進猪、鸡增重和提高饲料转化率。 目前国内兽药恩拉霉素含量测定方法的依据为中国农业部发布的1999年版《进口兽药质量标准》。依据恩拉霉素的药理学特点，在实际检测工作中对样品提取、缓冲液及终浓度等检测条件进行优化，建立新的检测方法，使得检测条件更合理，结果更精准。 1 材料与方法 1.1 试验材料 （1）试剂及培养基。冰醋酸、醋酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、丙酮、盐酸等试剂均为分析纯。试验用水为蒸馏水。pH 4.0醋酸盐缓冲液按照1999年版《进口兽药质量标准》提供方法配制[1]，pH 7.8的磷酸盐缓冲液按照2010版的《中国兽药典》一部附录抗生素微生物检定法配制[2]。抗生素检定培养基Ⅰ号pH 7.8、Ⅱ号pH 7.8均购于北京海淀中海动物保健科技公司。 （2）菌种及标准品。枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501]，金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]来源于中国兽医药品监察所。标准品由武汉兴鼎生物科技公司提供，标示效价为1 216 U/mg。 （3）样品4%的恩拉霉素预混剂由兴鼎生物科技公司提供。 （4）仪器设备。TO···试读结束