影响牛胚胎移植妊娠率的主要因素分析-《湖北畜牧兽医》(2013年6期).docx

龙源版权所有 影响牛胚胎移植妊娠率的主要因素分析作者：薛仰全来源：《湖北畜牧兽医》2013年第06期 摘要：近年来随着对影响胚胎移植妊娠率的胚胎质量、供受体同期性、受体体况、受体年龄、营养状况、胚胎移植时间、移植部位和环境条件以及移植后受体的饲养管理等诸多因素的不断深入研究，使该技术被广泛应用于牛羊等动物的良种快速扩繁的生产中。就影响牛胚胎移植妊娠率的主要因素进行了分析，以期为牛胚胎移植提供一定参考。 关键词：牛；胚胎移植；妊娠率；因素 中图分类号：S814.4 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2013）06-0074-04 自Georg首次提出动物胚胎移植概念后，研究胚胎移植技术的历史已经有了120多年。近20多年以来，随着胚胎移植技术中供受体选择、直肠黄体检查、同期发情、冻精授配、超数排卵、胚胎冷冻保存、胚胎解冻以及胚胎移植等关键环节技术，逐渐被众多畜牧兽医学者和科研技术人员所熟练掌握，特别是研究人员对影响胚胎移植妊娠率的胚胎质量、供受体同期性、受体体况、受体年龄、营养状况、胚胎移植时间、移植部位和环境条件以及移植后受体的饲养管理等诸多因素的不断深入研究。技术被广泛应用于牛、羊等动物的良种快速扩繁的生产中。目前，我国牛胚胎移植妊娠率一般在40%～60%，已达到世界同类高水平。但是，由于供受体不够理想、胚胎价格奇高和胚胎移植产业机制尚未健全以及广大农牧户收入偏低等因素的制约，在胚胎移植大面积推广工作中仍存在较大的难度。 1 胚胎 胚胎质量是胚胎移植妊娠率高低的决定因素。无论是体内胚胎，还是体外胚胎，高质量的胚胎，移植妊娠率就高。但就单一胚胎而言，胚胎的发育阶段或胚胎日龄、胚胎冷冻技术和解冻方法等因素对胚胎移植妊娠率也具有明显的影响。通常情况下，通过超数排卵所获得的体内胚胎的胚龄为6～10日龄。按胚胎的发育阶段，将胚胎可分为桑椹胚（M）、早期囊胚（EB）、囊胚（MB）、扩张囊胚（EXB）和孵化胚胎（HB）[1]。 Hasler等[2]认为牛鲜胚移植时，囊胚的移植妊娠率高于桑椹胚；Thibier等[3]认为囊胚的移植妊娠率与桑椹胚相似；Dochi等[4]认为扩张囊胚的移植妊娠率比桑椹胚低。根据研究资料，一般认为超数排卵供体发情受精后6～8 d，获得的优质胚胎移植妊娠率差异无统计学意义；但6～8 d的优质胚胎的移植妊娠率显著高于发情后9～12 d从供体所获得的优质胚胎的妊娠率，其移植妊娠率差异有统计学意义。 Crosier等[5]认为，胚胎质量不同（A级到C级），其移植妊娠率显著不同，早、晚期桑椹胚，和早、晚期囊胚的胚胎质量明显影响胚胎移植妊娠率。Leibo[6]研究发现冻胚移植妊娠率为40%～50%， 冻前A级或B级胚胎解冻后移植率为46%，C级胚胎的移植妊娠率为24%。Broadbent等[7]认为冻胚与鲜胚移植相比，冻胚移植妊娠率低8.5%～14.0%，主要原因是由于冷冻对胚胎物理和化学性损害所引起。胚胎质量、胚胎冷冻和解冻对胚胎的损伤，影响胚胎移植妊娠率。目前最理想的冷冻和解冻方法也将有10%～20%的胚胎受到伤害而死亡，死亡胚胎主要是质量差的胚胎[1]。 体外受精（IVF或IVP）胚移植成功率低于体内胚，但因其生产成本较低，多年来一直是主要的研究方向。由于不同生产方式生产的胚胎，其胚胎质量和发育潜能的不同，移植受胎率也就不同，因此生产高质量的胚胎是提高胚胎移植妊娠率的最有效措施之一[8，9]。 2 供受体同期性 由于受精卵（胚胎）在子宫环境中生长发育，其子宫内分泌发生变化直接影响着子宫内环境的变化，所以供体和受体在生理上的是否同一性直接影响着胚移妊娠率。胚胎移植某一发育阶段的胚胎在供体子宫所处的生理环境或早或迟于移植受体的子宫生理环境，必然影响移植胚胎的着床，所以供体与受体的发情的同期化就影响着移植妊娠率。 研究发现，当受体比供体发情早36 h时，胚胎移植妊娠率不受影响，原因目前尚不清楚，可能是由于超數排卵牛的胚胎发育比不超数排卵牛相对快所致[2]。当受体比供体发情晚12 h以上时，胚胎移植妊娠率就下降[10]。水牛在胚胎移植中，受体比供体发情晚不到12 h时胚胎移植妊娠率为41%，相差12 h时胚胎移植妊娠率为18%，受体比供体发情晚的时间超过12 h时，胚胎不能着床[11]。 将质量较差的胚胎移植到同期程度最佳的受体，将质量好的胚胎移植到同期程度较差的受体内，胚胎移植妊娠率最高[12]。将高质量的胚胎移植到同期或比供体发情早的受体中时，妊娠率差异无统计学意义，两者都高于比供体发情晚的受体移植妊娠率[11]。质量较差的胚胎移植到比供体发情早的受体中时，胚胎移植妊娠率低于与供体同期发情的受体，但当移植到比供体晚发情的受体时，胚胎移植妊娠率与前者没有差异[1]。由于质量较差的胚胎