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吸光光度法精品讲义;吸光光度法：分子光谱分析法的一种，又称分光光度法，属于分子吸收光谱分析方法 基于外层电子跃迁;10.2 吸光光度法基本原理;a 跃迁类型 价电子跃迁：σ→σ*, π→π*; n→σ*, n→π* ?E (h?) 顺序: n→π*<π→π*< n→σ*<σ→σ* ;物质的颜色;吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小 A～l关系 最大吸收波长 lmax：光吸收最大处的波长;原子光谱为线光谱 分子光谱为带光谱;4 朗伯-比尔定律; 当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系－－－朗伯比尔定律 －－－光吸收定律 数学表达：A＝lg(1/T)=Kbc 其中，A:吸光度，T:透射比， K:比例常数，b:溶液厚度，c:溶液浓度;摩尔吸光系数 e;桑德尔(Sandell)灵敏度： S 当仪器检测吸光度为0.001时，单位截面积光程内所能检测到的吸光物质的最低含量。 单位：mg/cm2 S=M/e ;吸光度的加和性;1 分光光度计的组成;常用光源;单色器 作用:产生单色光 常用的单色器：棱镜和光栅;检测器 作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号 常用检测器： 光电管 光电倍增管 光二极管阵列;目视比色法—比色管 ;10.4 显色反应及影响因素;络合反应;离子缔合反应;褪色反应 Zr(IV)-偶氮胂III络合物测定草酸;3 显色剂;三苯甲烷类 三苯甲烷酸性染料 铬天菁S ;邻菲罗啉类：新亚铜灵 ;4 多元络合物;5 影响因素;b 显色剂的用量;e 溶剂;10.5 光度分析法的设计;1 测定波长选择;2 测定浓度控制;3 参比溶液选择;4 标准曲线制作;10.6 吸光光度法的误差;1 非单色光引起的偏移;非均匀介质 胶体，悬浮、乳浊等对光产生散射，使实测吸光度增加，导致线性关系上弯;吸光度标尺刻度不均匀;1.示差吸光光度法 目的：提高光度分析的准确度和精密度 解决高(低)浓度组分(i.e. A在0.2~0.8以外)问题 分类：高吸光度差示法、低吸光度差示法、 精密差示吸光度法 特点： 以标准溶液作空白 原理： A相对 = ?A = ?bcx- ?bc0= ?b? c 准确度：读数标尺扩展, 相对误差减少, c0愈接近cx, 准确度提高愈显著;例：硫脲还原－硫氰酸盐比色法测定钢铁中的钼。酸溶，硫酸－高氯酸介质中，硫脲还原铁（III）为铁(II),除干扰，还原钼（VI）为五价，2.00mg/100ml的钼标准溶液为参比溶液，用的钼标准溶液，绘制工作曲线和测定样品溶液的吸光度,480nm测定A。 ;2.双波长吸光光度法 目的：解决浑浊样品光度分析 消除背景吸收的干扰 多组分同时检测 原理： ? A = Al1-Al2 = （?l1- ?l2）b c 波长对的选择： a.等吸光度点法，b.系数倍率法 ;3.导数吸光光度法;10.8 吸光光度法的应用;2 络合物组成确定 ;平衡移动法吸光光度法精品讲义;吸光光度法：分子光谱分析法的一种，又称分光光度法，属于分子吸收光谱分析方法 基于外层电子跃迁;10.2 吸光光度法基本原理;a 跃迁类型 价电子跃迁：σ→σ*, π→π*; n→σ*, n→π* ?E (h?) 顺序: n→π*<π→π*< n→σ*<σ→σ* ;物质的颜色;吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小 A～l关系 最大吸收波长 lmax：光吸收最大处的波长;原子光谱为线光谱 分子光谱为带光谱;4 朗伯-比尔定律; 当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系－－－朗伯比尔定律