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HEK细胞AST和FTcell区别比较
HEK-293细胞293A293S293T和293FTcell区别比较
293细胞分为几种,文献上所提总是笼统的讲293细胞,可293有293A,还有293T,请问二者有什么区别,是否293A是用来包腺病毒的,293T是用来包慢病毒的,是否还有其他293细胞,比如293S
课题需要做腺病毒转染,看了initrogen的说明书上说用293A细胞。在clontech的说明书上就是293细胞。
293细胞比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株:293T/17的转染效率更高,成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。
293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。
来源:人体肾脏形态:上皮细胞生长特性:贴壁注释:该细胞含腺病毒5DNA。
培养液:MEM(含2 mML-谷氨酰胺和Earle'sBSS,1.5 g/LNaHCO3,0.1 mM非必需氨基酸,1.0 mM丙酮酸钠),10%马血清(热灭活)。
传代:吸去培养液。用0.25%(w/)Trypsin-0.53 mMEDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次)
冻存:95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。
293A比较有意思了,是293中后来又建的细胞亚株,这个A是adhere的意思,就是说293倾向于形成单层细胞(monolayer),它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验(plaqueassay)293A是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(hole),就这个意思,这个A所对的是293S(suspension).
293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad5)DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。
293T细胞表达E1A蛋白,S40大T抗原,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达E1A
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