详细介绍抗原抗体反应.ppt

2016.12.05;抗原的基本知识 抗原决定簇 抗原-抗体相互作用;一、抗原的基本知识 ;外源性 分子大小 MW.>5000-10000 化学组成与复杂性 如异聚物比同聚物免疫原性更强 抗原加工和递呈的敏感性 如不可溶的大分子通常是比可溶性小分子免疫原性更强（不可溶的大分子易于吞噬和加工）；不能被降解递呈的大分子物质免疫原性很低。;1、抗原性与免疫原性;抗原性（特异反应性），指抗原与其诱导产生的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合的特性。;2、抗原的分类;半抗原 ;将半抗原与大的载体分子（通常是蛋白质）偶联在一起称为半抗原的转化作用。;超抗原（superantigen, SAg） ;? 超抗原与典型抗原;二、抗原决定簇;2.类型 （1）顺序决定簇(sequential determinant)，又称线性决定簇(linear determinant)，序列相连续的氨基酸片段构成的决定簇。 （2）构象决定簇(conformational determinant)，又称非线性决定簇(non-linear determinant)，由不相连接的氨基酸顺序片段经多肽折叠卷曲而组合起来的功能基团，一般位于蛋白质的表面。 ;结构决定簇与顺序决定簇;两种抗体与一个连续性抗原表位及一个非连续性抗原表位的相互作用;蛋白质结构与抗原表位;B细胞抗原表位的特性;TCR识别靶细胞表面MHC/抗原肽复合物;特性;4.抗原-抗体反应的特异性;5.共同抗原表位与交叉反应; 三、抗原-抗体相互作用;抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。;1、抗原抗体的亲和力和亲合力;亲和常数（K）：;亲合力（avidity）：是指一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关。另外也与亲和力强弱有关。;2、抗原抗体之间的相互作用力：;1、离子键;2、范德华引力;3、氢键结合力;4、疏水作用力（疏水键）;2、抗原抗体反应的特点;一、 特异性（specificity）;2、决定因素： 由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的。;概念：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。;二、可逆性（reversibility);4、决定抗原抗体解离的因素;三、比例性（proportionality）;出现沉淀量最多的管为最是比例管。;抗体与多价抗原结合的浓度带现象;;沉淀反应曲线;四、阶段性;抗原抗体反应影响因素;(二)抗体抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面： (1)来源：不同动物来源的免疫血清，其反应性存在差异。如家兔等大多数动物的免疫血清，由于具有较宽的等价带，与相应抗原结合易出现可见的抗原抗体复合物。马、人的免疫血清等价带窄，抗原不足或过剩，均易形成可溶性复合物。而单克隆抗体一般不用于沉淀或凝集反应。(2)浓度：抗体的浓度是相对于抗原而言的，二者浓度合适时才易出现可见的反应结果，所以在试验前应先进行预试验，滴定抗原抗体最佳反应浓度。(3)特异性与亲合力：特异性与亲合力是影响抗原抗体反应的关键因素，它们共同影响试验结果的准确度。试验试剂应尽可能选择高特异性、 高亲合力的抗体，以保证试验的可靠性。;二、环境条件 (一)电解质 抗原与抗体发生结合后，由亲水胶体变为疏水胶体的过程中须有电解质参与才能进一步使抗原抗体复合物表面失去电荷，水化层破坏，复合物相互靠拢聚集，形成大块的凝集或沉淀。若无电解质参加，则不出现可见反应。为了促使沉淀物或凝集物的形成，常用 O.85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液。但电解质的浓度不宜过高，否则会出现盐析现象。 (二)酸碱度 蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应必须在合适的 pH 环境中进行，pH 过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质。抗原抗体反应一般在pH为 6～9 进行。;(三)温度抗原抗体反应必须在合适的温度中进行，一般以 15～40℃为宜，最适反应温度为 37℃。某些特殊的抗原抗体反应，对温度有一些特殊的要求，例如冷凝集素在 4℃左右与红细胞结合最好，20℃以上反而解离。此外，适当振荡和搅拌也能促进抗原抗体分子的接触，加速反应，其作用与反应物粒子大小成正比。;抗原抗体反应类型;反应类型;反应类型;是指颗粒性抗原，例如细菌、红细胞、螺旋体、细胞性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，与相应的抗体（或抗原）在适量的电解质存在的条件下，经一定时间后凝聚成肉眼可见的凝集现象。 用于凝集反应中的抗原称凝集原(agglutinogen)。 用于凝集反应中的抗体称凝集素（agglutinin)。;凝集反应的类型;53;2、沉淀反应(Precipitation);沉淀