毕业设计（论文）-饲料添加酸性、中性蛋白酶活力的测定—福林显色法.docxVIP

浙江经贸职业技术学院毕业论文（设计）  PAGE \* MERGEFORMAT II 浙江经贸职业技术学院毕业论文（设计） 毕 业 论 文（设计） 题 目 饲料添加剂酸性、中性蛋白 酶活力的测定—福林显色法 指导老师 专业班级 食品营养与检测1213 姓 名 学 号 2015年 5月 28日 PAGE \* MERGEFORMAT III  PAGE \* MERGEFORMAT I 摘要: 蛋白酶在一定的温度和pH条件下，水解酪素底物产生含有酚基的氨基酸（如酪氨酸、色氨酸），在碱性条件下，将福林试剂（Folin）还原，生成钼蓝与钨蓝，其颜色的深浅与酚基氨基酸含量成正比。通过在660nm测定其吸光度，计算出蛋白酶活力。本实验确定了样品的提取液为蒸馏水、底物酪蛋白用量为1mL、样品的稀释倍数（酸性蛋白酶为1500-2500，中性蛋白酶为500-2000），并对样品中酸性和中性蛋白酶活力的稳定性进行测定，测得的稳定性较高。本方法测得的两种样品的标准偏差均小于10%，因此该方法具有良好的精密度。 关键词：饲料添加剂；酸性和中性蛋白酶；酶活力  目 录  TOC \o "1-3" \h \z \u  HYPERLINK \l "_Toc420227408" 引言  PAGEREF _Toc420227408 \h 1  HYPERLINK \l "_Toc420227409" 1 实验材料  PAGEREF _Toc420227409 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227410" 1.1 原料  PAGEREF _Toc420227410 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227411" 1.2 仪器设备  PAGEREF _Toc420227411 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227412" 1.3 主要试剂  PAGEREF _Toc420227412 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227413" 2 样品酶液的制备及其酶活力的测定  PAGEREF _Toc420227413 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227414" 2.1 主要试剂的配制  PAGEREF _Toc420227414 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227415" 2.1.1 1mol/L及0.1mol/L的盐酸溶液的配制  PAGEREF _Toc420227415 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227416" 2.1.2 0.4mol/L的碳酸钠溶液的配制  PAGEREF _Toc420227416 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227417" 2.1.3 福林试剂的配制  PAGEREF _Toc420227417 \h 2  HYPERLINK \l "_Toc420227418" 2.1.4 pH3.5乳酸缓冲液的配制  PAGEREF _Toc420227418 \h 3  HYPERLINK \l "_Toc420227419" 2.1.5 pH7.0的磷酸缓冲液的配制  PAGEREF _Toc420227419 \h 3  HYPERLINK \l "_Toc420227420" 2.1.6 1.0%酪蛋白溶液的配制  PAGEREF _Toc420227420 \h 3  HYPERLINK \l "_Toc420227421" 2.1.7 0.4mol/L的三氯乙酸溶液的配制  PAGEREF _Toc420227421 \h 3  HYPERLINK \l "_Toc420227422" 2.1.8 L-酪氨酸标准溶液的配制  PAGEREF _Toc420227422 \h 3  HYPERLINK \l "_Toc420227423" 2.2 样品酶液的制备  PAGEREF _Toc420227423 \h 3  HYPERLINK \l "_Toc420227424" 2.3 酸性和中性蛋白酶活力的测定方法  PAGEREF _Toc42