病理科-组织化学染色技术.ppt

1、亚铁氰化钾法 方法： 结果:含铁血黄素呈蓝色，细胞核呈红色。 2、普鲁士蓝（Perls blue）染色 普鲁士蓝反应显示三价铁 原理：盐酸与含铁血黄素中的三价铁反应形成三氯化铁，三氯化铁与亚铁氰化钾反应生成一种稳定的化合物——蓝色的亚铁氰化铁（普鲁士蓝）。 方法步骤： 染色结果：含铁血黄素呈蓝色，其他组织浅红色。 铁染色：含铁血黄素 （十四）、胆色素染色 胆色素（Bile pigment）染色在病理诊断上主要用以观察胆道堵塞和血红蛋白代谢障碍等疾患所引起的胆汁淤积。 病理改变为胆色素出现在干细胞、毛细胆管、小胆管、Kupffer细胞等，在肾曲管上皮中呈颗粒或团块状结晶。高胆红素血症时，胆红素颗粒可见于网状内皮细胞等处。 三氯醋酸三氯化铁法 方法步骤： 结果：胆色素呈翠绿色至深绿色，胶原纤维呈红色，肌纤维和细胞质呈黄色。 （十五）、脂褐素染色 脂褐素（Lipofuscin）是一种细小的、大小一致呈小滴状的浅棕色或金黄色颗粒。 脂褐素化学成分约50%为脂质，其余为蛋白质和其他物质。 常见于老年人的心肌细胞、肝细胞、肾上腺皮质的网状带细胞、睾丸间质细胞及神经节细胞内。 早期脂褐素保持脂类染色特点，可用苏丹黑B等显色。晚期脂褐素已完全氧化，失去嗜苏丹特性。 1、三氯化铁氰化钾法 方法： 结果：脂褐素和黑色素呈暗蓝黑色，亲银细胞颗粒呈蓝色，嗜铬细胞颗粒呈绿蓝色，细胞核呈红色。 2、醛品红法 方法： 结果：脂褐素呈深紫色，弹力纤维业呈紫色至深紫色，肥大细胞胞质内颗粒呈紫色。 除甲醛色素法 甲醛色素（formalin pigment）是一种暗棕色或黑色无定形颗粒，光镜下呈双折光，不溶于水、乙醇和二甲苯，铁反应阴性。 常见于含血较多的组织，如肝、脾等器官，是酸性甲醛作用于组织内血红蛋白形成酸性甲醛正铁血红素复合物。这种色素应在染色前去除。 组织切片浸入苦味酸饱和乙醇液内5~30分钟，期间定期取出光镜下观察。 （十六）、核酸染色法 核酸（Nucleic acid）是细胞遗传物质的基本化学物质。根据其生物功能和化学结构，分为核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）两类。 RNA主要存在于细胞质内（胞质约占90%，核仁约占10%），DNA主要存在于细胞核内（胞核约占99%，胞质线粒体约占1%）。 DNA常用酸水解-无色品红染法（Feulgen染色法）显示，甲基氯派洛宁法显示RNA和DNA。 应用： 1、用于肿瘤的诊断和研究，测定DNA含量，有助于判断肿瘤的良恶性及分化程度，并估计肿瘤患者的预后。 2、用于免疫性疾病的诊断和研究，如免疫缺陷、自身免疫疾病、过敏反应等。 1、酸水解-无色品红染法（Feulgen法） 方法：通过酸水解，打开DNA的嘌呤基-糖苷，释放出反应型醛基，游离醛基与Schiff试剂结合，形成紫红色复合物，从而显示DNA。 结果：DNA呈红紫色，胞质和其他成分呈淡绿色。 DNA Feulgen染色 2、甲基氯派洛宁法 方法: 结果：存在于胞质和核仁内的RNA呈红紫色，胞核内DNA呈绿色或蓝绿色。浆细胞胞质也呈较深红紫色。 （十七）、真菌染色 真菌（fungus）种类较多，常见的致病菌如毛霉菌、曲菌、隐球菌、放线菌和白色念珠菌等。 真菌的基本结构成分是含较多的黏多糖和蛋白质。 过碘酸-无色品红法（PAS）：真菌菌丝及孢子呈红紫色，胞核蓝色。 无色品红-醛品红法：真菌菌丝及孢子呈紫红色至深紫红色，背景黄色，弹力纤维和黏液呈深紫色。 六胺银法：真菌菌丝及孢子呈棕黑色至黑色，上皮黏液棕黑色，背景为橙黄色。 爱新蓝（AB）pH2.5法：新型隐球菌荚膜呈蓝色。胞核淡蓝色，一般黏液蓝色，其他组织呈红色。 黏液胭脂红法：新型隐球菌荚膜呈玫瑰色，胞核呈蓝色，一般黏液也呈玫瑰色。 银染：霉菌 银染：毛霉菌 1、硝酸银浸镀法 方法： 结果：神经轴突、神经细胞内原纤维、神经原纤维结、老年斑及树突呈黑色，背景呈金黄色至棕黄色。 2、甘氨酸银浸镀法 方法: 结果：神经轴突等呈黑色，背景呈棕黄色。 3、砂罗铬花青R法 方法： 结果：神经髓鞘呈蓝色，红细胞呈深蓝色，神经细胞胞质、肌纤维和胶原纤维呈桃红色，胞核呈蓝色。 4、氯化金升汞法 方法: 结果：星形胶质细胞及其突起呈紫红色至紫黑色，神经细胞呈浅紫红色，神经纤维不着色。 5、缓冲亚甲蓝法 方法: 结果：尼氏体（Nissl body）及核仁呈蓝色。 用镀银法可以在神经元胞浆中看到许多交错成网的细丝，并伸入树突之中。 某些疾病时，神经原纤维集结，可用镀银染色清晰地显示。 神经染色的应用范围： （1）、神经组织疾病的诊断： 中毒性外围神经疾病、维生素B1缺歹症、麻风病及其他外周神经病