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实验8 rna的成分鉴定
实验 八 核糖核酸的组分鉴定; 核糖核酸的组成成分主要包括核糖、磷酸和碱基。;2.在碱性环境下,嘌呤碱能与银离子反应形成沉淀,但此处碱性环境不能用一般的强碱,否则强碱会与银离子反应产生沉淀而干扰结果判定。
3. 核糖核酸与浓盐酸共热时,会发生降解,形成的核糖继而转变成糠醛,后者可与3,5-二羟基甲苯(地衣酚)反应,在Fe3+或Cu2+催化下,生成绿色复合物。
4. 磷酸组分可与定磷试剂在酸性环境中反应,生成蓝色物质。因此,可以根据以上性质,设计实验对各组分进行鉴定。
; (1)1.5M硫酸;
(2)0.1mol/L硝酸银溶液;
(3)1mol/L浓氨水;
(4)三氯化铁-浓盐酸溶液:
(5)地衣酚-乙醇溶液:
(6)定磷试剂:17%的硫酸,10%的抗坏血酸和2.5%的钼酸铵。;1. 取100mg实验七中提取的酵母RNA,加入1.5M H2SO4溶液5mL,在沸水浴中加热10-20分钟,使核酸充分水解后,用于对各组分的鉴定。
2. 磷酸组分鉴定:取水解液1mL,加入干净的试管中,再加入等体积的新配制的定磷试剂1mL,混匀后,在45℃左右的水浴中加热15-30min,观察颜色变化。;3. 嘌呤碱的鉴定:取水解液1mL,加入干净的试管中,加入过量的浓氨水,再加入1mL的0.1M的硝酸银溶液,观察沉淀的生成。
4. 核糖的鉴定:取水解液1mL,加入干净的试管中,再加入2mL三氯化铁-浓盐酸溶液和0.2mL苔黑酚-乙醇溶液,放置在沸水浴中加热10-30min,观察颜色变化。;谢谢!
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