项目简介范本.doc

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项目简介范本 1、项目简介:严格按照如下所举2个范例撰写 2、图片要求:图片清晰,可直观反映项目情况,3-5张图片(电子图片应在300万像素以上并配有图片说明,图片格式为JPG),图片不粘贴在文本中,与文本放于同一文件夹中。 红花油体等生物反应器关键技术研究及应用 吉林农业大学 李校堃 一、项目简介 本项目围绕生物反应器的关键技术问题重点开展工程化技术研究,采用植物油体系统实现了外源蛋白的高效表达,并解决了蛋白分离纯化的、问题;基于分子伴侣与重组蛋白共表达的理论构建了外源蛋白可溶性表达体系,实现了外源蛋白的可溶性高效表达;采用定点化学修饰技术,解决了外源药物蛋白易降解、不稳定和半衰期短等问题;利用食用菌菌丝体具有很强外源蛋白表达能力,生长周期短易于规模生产的优点建立了食用菌表达外源蛋白的技术平台;利用大肠杆菌分泌型表达系统,将目的蛋白分泌到细胞周质之中,减少了纯化步骤降低了生产成本,并使得产品质量更加可控。利用上述生物反应器关键技术表达的成纤维细胞生长因子(FGFs)和生长激素,相继开发了冻干粉试剂、滴眼液、注射液、凝胶剂及机体介入式的国家Ⅲ类医疗器械。目前上述药物和机械已进入临床试验,设计大面积烧伤、慢性难愈合创面、慢性肉芽创面、整形手术后创伤愈合及生长激素缺乏症等。该项目申请国家发明专利11项,获授权8项,专利技术产品近三年累计产值达11.58亿元,产生了显著的经济和社会效益。 二、创新点 1.利用油体蛋白与外源药物蛋白在植物油体中融合表达的特征,建立了植物油体生物反应器技术平台,成功解决了植物反应器外源蛋白表达量低及分离纯化困难等难题 利用具有自主知识产权的红花油体蛋白启动子,油体蛋白基因及终止子等调控元件,以及成纤维细胞生长因子FGF基因,构建了pSaop-sao-FGF-sater植物油体特异性表达载体,并进行了红花的转化。一方面,实现了外源药物蛋白FGF在植物油体中的特异性、高效表达(表达量占种子总蛋白的0.2%),降低了生产成本;另一方面,由于油体蛋白-外源药物蛋白镶嵌在油体表面,易于分离纯化,获得目的蛋白。 2.利用分子伴侣SUMO与外源药物蛋白在大肠杆菌中共表达的特征,构建了SUMO-外源药物蛋白融合表达体系,实现了外源药物蛋白的高效可溶性表达 筛选并合成了大肠杆菌SUMO基因,并以此作为FGF可溶性表达载体的分子伴侣,它不仅可以促进外源蛋白的正确叠合同时还能保证酶切完全。在此基础上,进一步构建了包括以串联方式连接处于lacZ启动子控制下的SUMO基因和处于T7启动子控制下并在上游包括一个分泌信号序列的外源药物蛋白基因(FGF)重组表达载体pT7-SUMO-FGF。最后将重组载体转化感受态大肠杆菌BL21,并通过IPTG诱导表达方法获得了可溶性表达的FGF。 3.通过化学修饰技术,获得了稳定性显著提高,体内半衰期显著延长的新型修饰蛋白PEG-外源药物蛋白 根据自有的专利技术,并根据蛋白本身的特性,建立相应的修饰方法,使得每个外源蛋白与单一PEG分子藕联,最终产物成分单一,易于分离纯化,回收率高。修饰后的生长激素与修饰前相比不仅稳定性得到显著提高,半衰期也由原先的不足2小时,延长至5-7天,用药频率由每天注射改为一周注射一次,具有很强的实用性。 4.利用食用菌菌丝体具有很强外源蛋白表达能力,生长周期短易于规模生产的优点建立了食用菌表达外源蛋白技术平台 以烟草花叶病毒35S为启动子,构建含有碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因的双元表达载体,并将重组质粒转入到根癌农杆菌EHA105中。以金针菇(Flammulina velutipes)菌丝体为受体材料,通过根癌农杆菌介导的方法转入bFGF,建立了食用菌表达外源蛋白技术平台。 5.利用大肠杆菌分泌性表达系统,将目的蛋白分泌到细胞周质之中,减少了纯化步骤降低了生产成本,并使得产品质量更加可控 通过对信号肽进行改造及对分泌系统元件的基因进行调控改造,增加参与转运的蛋白表达量,并通过培养条件的优化建立了成熟的大肠杆菌分泌表达技术平台。 玉米蛋白质资源高值化利用关键技术研究与开发 吉林农业大学 王大为 一、项目简介 1.主要科技内容 首次采用超临界CO2流体萃取分离技术对玉米蛋白粉及富含蛋白质的玉米胚粕进行脱脂、脱杂纯化处理,在有效保护目的物活性的同时,打开玉米蛋白的致密结构,成功解决了玉米蛋白无变性解聚的技术难题,大幅度减小了目的物溶出阻力;采用微波震荡热水浸提法提取脱脂、脱杂后玉米蛋白粉中的还原型谷胱甘肽(GSH);采用超声波法提取脱脂、脱杂后玉米胚粕中的超氧化物歧化酶(SOD);采用等电点法提取玉米胚粕蛋白,首次采用高压挤出改性技术改善玉米胚粕蛋白的疏水性及拟脂性,再将提取GSH所剩的玉米蛋白与改性玉米胚粕蛋白混合后进行低温微粒化及乳化处理,生产出具有天然油脂

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