研究内容与方法 2.docVIP

研究内容与方法 2.动物实验部分 2.1分组和造模 SD雄性大鼠91只,随机取13只作为空白对照组,余下78只腹腔注射阿霉素心衰造模4周后,按体重随机分为6组(ADR心衰模型组、w-3多不饱和脂肪酸低、中、高剂量组、卡托普利组、心宝丸组),每组各13只。2.2给药方法 分组后,开始给予治疗用药,即w-3多不饱和脂肪酸低、中、高剂量组分别给予0.45g/kg/d, 0.9g/kg/d和1.8g/kg/d,卡托普利组给予6.75mg/kg/d,心宝丸组为194.4mg/kg/d,正常对照组和ADR心衰模型组给予同体积蒸馏水灌胃,连续给药六周。2.3连续给药六周后,行血流动力学测定,检测心衰大鼠血浆Ang、ALD、心肌肌浆网Ca2--ATP酶活性以及基质金属蛋白酶活性,观察心衰大鼠心肌组织病理及超微结构。 研究结果 1.临床研究部分 1.1治疗前与治疗后比较,治疗组的SV、SI、CO、CI差异有显著性(P0.05),对照组的SV、SI、CO、CI差异有显著性(P0.05)。治疗后,治疗组与对照组比较,SV、SI、CO、CI差异有显著性(P0.05)。治疗后,两组CO、CI、SV、SI均较治疗前显著上升(P0.05)。 1.2改善心功能方面,治疗后治疗组总有效率为96%,对照组总有效率为80%,治疗组明显高于对照组。治疗组与对照组NYHA心功能分级的疗效比较差异有显著性(P0.05)。 1.3中医证候疗效方面,治疗后治疗组总有效率为92%,对照组总有效率为80%,治疗组明显高于对照组。经Ridit分析,两组间中医证候疗效比较差异有统计学意义(P0.05),提示治疗组在改善中医证候疗效方面优于对照组。 1.4经统计学处理,在改善气喘、困倦乏力、纳呆、肢肿等症状两组间相比差异有显著性(PO.05),治疗组疗效优于对照组;其余症状两组间相比较差异无显著性(P0.05)。 1.5安全性监测结果显示与治疗前相比基本相同,未发现恶化者,说明w-3多不饱和脂肪酸有良好耐受性,未见明显或严重不良反应。 2.动物实验部分 2.1血流动力学指标检测结果 与ADR模型组相比,w-3多不饱和脂肪酸各组SAP、DAP、LVSP、±dp/dtmax均有回复升高作用,以中、高剂量组尤为明显(PO.05或P0.01),阳性对照药卡托普利组以及心宝丸组对SAP、DAP、LVSP、±dp/dtmax也有明显升高作用(P0.05或P0.01)。 2.2心肺肝组织重量指数测定 与模型组相比,各治疗组心、肝、肺重量指数分别有不同程的降低,其中各给药组均能显著降低心脏系数(P0.05或P0.01),中剂量组和卡托普利、心宝丸组能显著降低肝脏系数(PO.05)。 2.3心肺肝组织形态学观察 2.3.1光镜 药物干预各组心肌细胞排列紧密,部分呈局灶性的心肌细胞肌浆溶解,呈散在性的心肌细胞空泡样变,较模型组好转,特别是w-3多不饱和脂肪酸高剂量组可明显改善ADR对心肌损伤,并接近正常心肌组织的形态表现。 2.3.2电镜 暖心高剂量组：心肌病变明显减轻,仅部分肌原纤维排列紊乱,无溶解、坏死等病变,部分线粒体水肿。卡托普利和心宝丸组与暖心高剂量组相接近：肌原纤维灶性溶解,断裂,肌浆网扩张,线粒体数目增多,大小不一,部分线粒体水肿,嵴减少或消失,甚至空泡变。 2.4心肌肌浆网Ca2+-ATPase活性和血浆Ang、ALD水平的测定 与ADR模型组比较,w-3多不饱和脂肪酸中、高剂量组、卡托普利组以及心宝丸组心肌肌浆网Ca+-ATPase活性明显升高(P0.05或PO.01),血浆Ang、ALD含量则明显降低(P0.05或P0.01)。 2.5心肌MMP-1、MMP-9、TIMP-1基因蛋白表达检测 与模型组相比,w-3多不饱和脂肪酸各组对MMP-1和TIMP-1均有改善作用但无显著意义(P0.05),w-3多不饱和脂肪酸各组对MMP-9有显著作用,其中以中、高剂量组尤为明显(P0.05),阳性对照药卡托普利组以及心宝丸组对MMP-9也有明显升高作用(PO.05)。 研究结论 1.w-3多不饱和脂肪酸对于心力衰竭患者有确切疗效。通过本课题的研究表明,它能够改善心衰患者的临床症状、心功能状态及更好地改善心脏彩超指标,未发生毒、副作用,是治疗心力衰竭有效安全的中成药物。 2.本文在有效临床研究的基础上,采用蒽环类药物阿霉素腹腔注射,成功的复制出慢性心功能不全大鼠模型,符合慢性心功能不全的病理生理学特点,并通过该法对有关指标的干预,探讨慢性心功能不全发病机制及w-3多不饱和脂肪酸治疗慢性心功能不全的作用机理： 2.1慢性心功能不全大鼠血流动力学异常改变,w-3多不饱和脂肪酸能提高±dp／dtmax、LVSP水平,降低LVEDP水平,增强心脏收缩和舒张性能,降低心率,从而有效改善血流动力学； 2.