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DAN复制的酶学机制（二）

DNA的复制1、解螺旋酶2、单链DNA结合蛋白3、DNA聚合酶4、引物酶5、DNA连接酶6、拓扑异构酶参与的蛋白质因子

4、引物酶引物酶的作用：以复制起始部位的DNA链为模板，按碱基互补配对的原则合成引物RNA。DNA聚合酶不能自行从头合成DNA链，必须有一段多核苷酸链作为引物。催化引物合成的酶称为引物酶，实际上它是一种特殊的RNA聚合酶。

3’5’3’5’引物是由引物酶催化合成的短链RNA分子。十几或数十个核苷酸组成，5’－3’合成。引物3HO5引物酶

5、DNA连接酶DNA连接酶的作用：将一个DNA片段的3’-OH末端与另一个DNA片段的5’-P末端连接，形成磷酸二酯键。消耗能量。PHO连接酶ATPADP

功能：DNA连接酶在复制中起最后接合切口的作用。在DNA修复、重组及剪接中也起缝合切口作用。也是基因工程的重要工具酶之一。

6、拓扑异构酶解链过程中，DNA分子会过度拧紧、打结、缠绕、连环等现象，均需DNA拓扑异构酶，改变DNA分子构象，理顺DNA链，使复制能顺利进行。108局部解链后

【解链过程中正超螺旋的形成】

拓扑异构酶作用特点既能水解、又能连接磷酸二酯键。作用机制：拓扑异构酶Ⅰ（ω-蛋白）拓扑异构酶Ⅱ（旋转酶）切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。反应不需ATP。切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能，连接断端，DNA分子进入负超螺旋状态。

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