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;原理;原理;基本实验步骤;基本实验步骤;基本实验步骤;衍生PCR技术;逆转录PCR;RealTimeqPCR;基线(Baseline)
是指在PCR扩增反应的最初数个循环里,荧光信号变化不大,接近一条直线,这样的直线即基线。
光阈值(threshold)
一般将PCR反应前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光域值是PCR3-15个循环荧光信号标准差的10倍,荧光域值设定在PCR扩增的指数期
Ct(Cyclethreshold)值
表示每个PCR反应管内荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数;固定循环数后,荧光信号与模板数成正比。
初始DNA量越多,荧光达到阈值时所需要的循环数(Ct值)越少。
起始模板的对数浓度与Ct呈线性关系,根据样品的Ct值就可计算出样品中所含的模板量。;RealTimeqPCR;
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