5.3 血红蛋白的提取和分离 课件-高中生物选择性必修1.pptx

5.3 血红蛋白的提取和分离;【回顾】生命活动的主要承担者——蛋白质;1、组成蛋白质的基本单位——氨基酸 （1）结构通式： （2）组成元素：;C;C;C;;C;1一条肽链如何形成有一定空间结构的蛋白质分子？;4、蛋白质功能多样性 （2）催化功能；绝大多数酶； （3）运输功能； （4）传递信息、调节的功能；蛋白质类激素 （5）免疫功能；;【思考】血液中是否只有血红蛋白1种蛋白质？;【拓展】血液的组成 ;血液;【思考】怎样从血液中分离出血红蛋白呢？;一、分离蛋白质的基本思路：;二、分离蛋白质的方法——凝胶色谱法;当不同的蛋白质通过凝胶时;二、分离蛋白质的方法——凝胶色谱法;1、用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是 A 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质 B 相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质 C 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质 D 二者根本无法比较;2.相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个;【思考】怎样保证在分离过程中蛋白质性质基本不变？;三、磷酸缓冲液;三、分离蛋白质的方法——电泳;形成阻力，影响速率;3、方法： （1）琼脂糖凝胶电泳 （2）聚丙烯酰胺凝胶电泳;多孔凝胶;例：电泳是分离鉴定蛋白质的常用方法。一个蛋白质分子在某pH溶液时，蛋白质解离成正、负离子。当蛋白质净电荷为0时，对应的溶液pH称为该蛋白质的等电点（pI）。蛋白质所处溶液pH＞pI时，蛋白质带负电荷，反之带正电荷。下表为几种血清蛋白的等电点。 将血清蛋白在pH=8．6的缓冲液中进行电泳，结果如图所示 据图分析，带负电荷最多的蛋白是____，α1和α2球蛋白分子 量较小的是____，相对含量最多的蛋白质是____，依据是 _ ____ ____ ____ ____ ___。;变式1：红细胞中含有大量血红蛋白，红细胞的功能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题： （1）同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技??将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移率的因素包括蛋白质分子的________、________以及分子的形状等。;（2）图1、图2分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到的结果，则图2中与图1中蛋白质P对应的是________（填字母）。;变式2：研究发现黄芪（一种中药材）中的糖蛋白（一类由糖类与多肽或蛋白质连接而形成的结合蛋白）具有免疫抑制作用，对自身免疫性脑脊髓炎小鼠的治疗有良好效果。为优选出黄芪糖蛋白的最佳提取方法，研究人员进行了相关实验。某研究人员采用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳对4种不同方法提取出的黄芪糖蛋白进行分离的结果如图所示。 ①SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理 是_______________________________________， 因而掩盖了不同种蛋白质间电荷差别，使电泳的 迁移率完全取决于_______________。;变式2：②图中Marker(标样)所起的作用是_________，不同的条带和条带的深浅分别代表_____________________。 ③据图分析，你认为黄芪糖蛋白的最佳提取方法是________________，作出判断的依据是_____________________。;变式3：已知某动物蛋白质含有4条肽链。将凝胶色谱柱分离得到的该蛋白质用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离。下图是电泳结果，结果表明分离得到的蛋白质纯度较高，判断依据是_____，该蛋白质的分子量约为_____。;变式4：下图为某种遗传病患者的系谱图，其中基因带谱是用凝胶电泳法所得到的个体基因组成，据图推断正确的是（???????） A．致病基因可能位于常染色体或X染色体 B．3号个体为显性纯合子 C．该家庭再生一个正常女孩的概率是3/4 D．2号的一个初级卵母细胞只含1个致病基因;【小结】电泳;凝胶色谱法与电泳法比较;四、血红蛋白的提取和分离 ;样品处理;样品处理;样品处理;样品处理;样品处理;Stp 1：分离血红蛋白;粗分离;粗分离;样品处理;纯化;纯化;纯化;纯化;思考：与其他蛋白相比，血红蛋白有什么特点？这一特点对你进行蛋白质得分离有什么意义？; 由于凝胶色谱法主要是根据蛋白质相对分子量的大小进行纯化，导致纯化得到的蛋白质可能含有一些其他相对分子量差不多的杂质，因此还需要进行纯度鉴定.;鉴定;1、以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是（ ） A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂 B.猪成熟红细胞